Ïðàê íàâûêè – Flashcards
Unlock all answers in this set
Unlock answersquestion
Îñíîâíûå ïðàâèëà ïîâåäåíèÿ â áàêòåðèîëîãè÷åñêîé ëàáîðàòîðèè |
answer
1.  ïîìåùåíèå ëàáîðàòîðèè íåëüçÿ âõîäèòü áåç ñïåöèàëüíîé îäåæäû: õàëàòà, òàïî÷åê, ñìåííîé îáóâè, 2.  ëàáîðàòîðèþ íåëüçÿ âíîñèòü ïîñòîðîííèå âåùè, çàïðåùàåòñÿ êóðèòü è ïðèíîñèòü ïèùó. 3. Ïðè ðàñïàêîâûâàíèè çàðàçíîãî ìàòåðèàëà íåîáõîäèìî ñîáëþäàòü îñòîðîæíîñòü: ïðîáèðêè ñíàðóæè îáòèðàòü äåçèíôèöèðóþùèì ðàñòâîðîì: ïåðåëèâàíèå æèäêîñòåé, ñîäåðæàùèõ ïàòîãåííûå ìèêðîáû, ïðîèçâîäÿò íàä ñîñóäîì, ñîäåðæàùèì äåçèíôèöèðóþùèé ðàñòâîð. 4. Åñëè ðàçáèëàñü ïîñóäà. Ñîäåðæàùàÿ çàðàçíûé ìàòåðèàë (ïðîáèðêà, ÷àøêà Ïåòðè), íåìåäëåííî ïðîèçâîäèòñÿ îáåççàðàæèâàíèå ïðåäìåòîâ, ©äåæäû, ñòîëà è ïîìåùåíèÿ. 5. Ïîñëå îêîí÷àíèÿ ðàáîòû äåçèíôèöèðóþò ðóêè è ïîâåðõíîñòü ðàáî÷åãî ñòîëà. 6. Ìóçåéíûå êóëüòóðû ìèêðîáîâ ñòàâÿò íà õðàíåíèå â õîëîäèëüíèê, çàêðûâàþò è îïå÷àòûâàþò. 7. Ðàáîòíèêè ëàáîðàòîðèè ïîäëåæàò îáÿçàòåëüíîé âàêöèíàöèè ïðîòèâ òåõ èíôåêöèîííûõ áîëåçíåé, ñ âîçáóäèòåëÿìè êîòîðûõ îíè ðàáîòàþò. Íà êàôåäðå ìèêðîáèîëîãèè èñïîëüçóþòñÿ ìàòåðèàëû, ñîäåðæàùèå âîçáóäèòåëåé III-IV ãðóïï, ïîñëå ðàçðåøåíèÿ ïðåäñåäàòåëÿ ðåæèìíîé êîìèññèè Ðåñïóáëèêàíñêîé ÃÝÑ. |
question
Ïðàâèëà çàáîðà ìàòåðèàëà äëÿ ìèêðîáèîëîãè÷åñêèõ èññëåäîâàíèÿ |
answer
Ïðè çàáîðå è ðàáîòå ñ êëèíè÷åñêèì ìàòåðèàëîì ïåðñîíàë äîëæåí èñïîëüçîâàòü ïåð÷àòêè è õàëàò. Ñðîêè äîñòàâêè êëèíè÷åñêîãî ìàòåðèàëà â ëàáîðàòîðèþ äîëæíû áûòü ñîêðàùåíû äî ìèíèìóìà. Êðîâü äëÿ ïîñåâà ñëåäóåò áðàòü äî íà÷àëà àíòèáàêòåðèàëüíîé òåðàïèè; íà âûñîòå ïîäúåìà òåìïåðàòóðû; ó ïîñòåëè áîëüíîãî ñ ñîáëþäåíèåì ïðàâèë àñåïòèêè. Ïîñåâ ïðîèçâîäèòñÿ â äâîéíóþ è òèîãëèêîëåâóþ ñðåäó â ñîîòíîøåíèè 1:10. Ìî÷à äëÿ ïîñåâà áåðåòñÿ äî íà÷àëà àíòèáàêòåðèàëüíîé òåðàïèè. Ìî÷à çäîðîâîãî ÷åëîâåêà ñòåðèëüíà. Îò íà÷àëà âçÿòèÿ ïðîáû ìî÷è äî íà÷àëà èññëåäîâàíèÿ â ëàáîðàòîðèè äîëæíî ïðîõîäèòü íå áîëåå 1-2 ÷àñîâ. Ãíîé ïîëó÷àþò ñ ïîìîùüþ ñòåðèëüíîãî øïðèöà èëè ñòåðèëüíîãî âàòíîãî òàìïîíà. Èñïðàæíåíèÿ íà ïàòîãåííûå ýíòåðîáàêòåðèè áåðóò ðåêòàëüíûìè ïåòëÿìè, ñìî÷åííûìè êîíñåðâàíòîì, è ïîìåùàþò â ïðîáèðêó ñ êîíñåðâèðóþùåé ñðåäîé. Ñëèçü èç íîñîãëîòêè (íà äèôòåðèþ) çàáèðàþò ñòåðèëüíûì òàìïîíîì íàòîùàê. Òàìïîí ïîìåùàþò â ñòåðèëüíóþ ïðîáèðêó è äîñòàâëÿþò â ëàáîðàòîðèþ íå ïîçæå 2-3 ÷àñîâ ñ ìîìåíòà çàáîðà ìàòåðèàëà. Ñïèííî-ìîçãîâóþ æèäêîñòü ïîëó÷àþò â ðåçóëüòàòå ëþìáàëüíîé ïóíêöèè. 3-5 ìë ëèêâîðà ïîìåùàþò â ïðîáèðêó (ïðè òðàíñïîðòèðîâêå ïðåäîõðàíÿòü îò îõëàæäåíèÿ). Ìîêðîòó ñîáèðàþò íàòîùàê ïîñëå îïîëàñêèâàíèÿ ðòà â ñòåðèëüíóþ ïîñóäó |
question
Ïðàâèëà çàáîðà ìàòåðèàëà, õðàíåíèè è òðàíñïîðòèðîâêå ïðè ÎÎÈ |
answer
Ê îñîáî îïàñíûì èíôåêöèÿì ïðåæäå âñåãî îòíîñèòñÿ ÷óìà. Ïðè ïîñòàíîâêå ïðåäâàðèòåëüíîãî äèàãíîçà «÷óìà» â ëàáîðàòîðèè ïðîâîäÿòñÿ ñðî÷íûå ìåðîïðèÿòèÿ: 1. Íåìåäëåííî ñîîáùàþò 8 âûøåñòîÿùèå îðãàíû çäðàâîîõðàíåíèÿ, 2. Íà ëàáîðàòîðèþ íàêëàäûâàåòñÿ êàðàíòèí, ò.å. íè îäèí ëàáîðàòîðíûé ðàáîòíèê, êîíòàêòèðîâàâøèé ñ çàðàçíûì ìàòåðèàëîì, íå äîëæåí ïîêèäàòü ïîìåùåíèÿ ëàáîðàòîðèè äî ïðèáûòèÿ ýïèäåìèîëîãà. 3. Âñå ìàòåðèàëû: îò áîëüíûõ, ÷èñòûå êóëüòóðû è ïàâøèå æèâîòíûå äîëæíû áûòü íàïðàâëåíû â ñïåöèàëèçèðîâàííûå ëàáîðàòîðèè äëÿ îêîí÷àòåëüíîãî óñòàíîâëåíèÿ äèàãíîçà. Ìåðû áåçîïàñíîñòè ïðè òðàíñïîðòèðîâêå Ìàòåðèàë ïîìåùàþò â áàíêè ñ ïëîòíî çàêðûâàþùåéñÿ ïðîáêîé, îáâÿçûâàþò ïåðãàìåíòîì(ò.å. âîäîíåïðîíèöàåìûì ìàòåðèàëîì), çàòåì îáâåðòûâàþò ñàëôåòêàìè, ñìî÷åííûìè 5% ðàñòâîðîì ëèçîëà èëè ôåíîëà.  òàêîì âèäå áàíêè ñ ìàòåðèàëîì ïîìåùàþò â ìåòàëëè÷åñêèå áèêñû. Íà áàíêè ñ ìàòåðèàëîì íàêëåèâàþò ýòèêåòêè. Âñå íàäïèñè íà ýòèêåòêå äåëàþò ïðîñòûì ãðàôèòíûì êàðàíäàøîì, ã.ê. íàäïèñè ÷åðíèëàìè ñìûâàþòñÿ ïðè äåçèíôåêöèîííîé îáðàáîòêå. 4. Ïîñëå îòïðàâêè ìàòåðèàëà ïðîâîäÿò çàêëþ÷èòåëüíóþ äåçèíôåêöèþ. Êóëüòóðó àâòîêëàâèðóþò ïðè òåìïåðàòóðå 120 ßÑ â òå÷åíèå 1 ÷àñà. Ñòåêëÿííóþ ëàáîðàòîðíóþ ïîñóäó îáåççàðàæèâàþò â 3% ðàñòâîðå õëîðàìèíà èëè êàðáîëîâîé êèñëîòû 1 ñóòêè, à çàòåì êèïÿòÿò â 1% ðàñòâîðå áèêàðáîíàòà íàòðèÿ. Òðóïû æèâîòíûõ àâòîêëàâèðóþò, çàëèâàþò 10% ðàñòâîðîì ëèçîëà íà ñóòêè è çàêàëûâàþò â ñïåöèàëüíî âûðûòóþ ÿìó. Êîæó îòêðûòûõ ÷àñòåé òåëà îáðàáàòûâàþò 70% ðàñòâîðîì ñïèðòà. |
question
Ñîñòàâèòü íàïðàâëåíèå íà ìèêðîáèîëîãè÷åñêîå èññëåäîâàíèå |
answer
Íàïðàâëåíèå íà èññëåäîâàíèå ÿâëÿåòñÿ ñîïðîâîäèòåëüíûì äîêóìåíòîì, êîòîðûé ïðèëàãàåòñÿ ê èíôåêöèîííîìó ìàòåðèàëó, ïðåäíàçíà÷åííîìó äëÿ ëàáîðàòîðíûõ èññëåäîâàíèè. Ñîñòàâëÿåòñÿ ïî ñëåäóþùåé ôîðìå: 1. íàçâàíèå ìàòåðèàëà 2. ó÷ðåæäåíèå, íàïðàâëÿþùåå ìàòåðèàë 3. ôàìèëèÿ, èìÿ îò÷åñòâî áîëüíîãî 4. âîçðàñò 5. àäðåñ áîëüíîãî 6. äàòà çàáîëåâàíèÿ 7. äàòà âçÿòèÿ ìàòåðèàëà 8. ïðåäïîëàãàåìûé êëèíè÷åñêèé äèàãíîç 9. ïîäïèñü âðà÷à, íàïðàâëÿþùåãî ìàòåðèàë Ïîñòóïèâøèé â ëàáîðàòîðèþ èíôåêöèîííûé ìàòåðèàë ðåãèñòðèðóåòñÿ â ñïåöèàëüíîì æóðíàëå. |
question
Äåçèíôåêöèÿ â ìèêðîáèîëîãè÷åñêîé ëàáîðàòîðèè |
answer
Äåçèíôåêöèÿ-ýòî îáåççàðàæèâàíèå îáúåêòîâ îêðóæàþùåé ñðåäû i ïîìîùüþ õèìè÷åñêèõ âåùåñòâ, îáëàäàþùèõ àíòèìèêðîáíûì äåéñòâèåì. Öåëü äåçèíôåêöèè-ïðåäóïðåäèòü ïåðåäà÷ó âîçáóäèòåëåé îã èíôèöèðîâàííîãî îðãàíèçìà íåèíôèöèðîâàííîìó.  ìèêðîáèîëîãè÷åñêîé ëàáîðàòîðèè èñïîëüçóþò: 1. õëîðíóþ èçâåñòü (0,1-10% ðàñòâîð); 2. õëîðàìèí (0,5-5% ðàñòâîð), äëÿ äåçèíôåêöèè ðóê 0,25-0,5% ðàñòâîð äëÿ äåçèíôåêöèè ïðåäìåòîâ óõîäà çà áîëüíûìè ïðè êèøå÷íûõ è âîçäóøíî^ êàïåëüíûõ èíôåêöèÿõ 1-3% ðàñòâîð, ïðè òóáåðêóëåçå-5% ðàñòâîð; 3. ôåíîë (êàðáîëîâàÿ êèñëîòà) â âèäå 3-5% ðàñòâîðà äëÿ äåçèíôåêöèè ïîìåùåíèé; 4. ëèçîë (3-5% ðàñòâîð); 5. áèãëþêîíàò õëîðãåêñèäèíà (ãèáèòàí), äëÿ äåçèíôåêöèè ðóê 0,5% ðàñòâîð, äëÿ äåçèíôåêöèè ïîìåùåíèé 0,1% ðàñòâîð; 6. äèõëîðèä ðòóòè (ñóëåìà)-èíîãäà èñïîëüçóþò äëÿ äåçèíôåêöèè ïðåäìåòîâ óõîäà çà áîëüíûìè. Ïðåïàðàò âûñîêîòîêñè÷åí, âñàñûâàåòñÿ ÷åðåç êîæó. |
question
Ïîäãîòîâêà ïîñóäû ê ñòåðèëèçàöèè |
answer
 áàêòåðèîëîãè÷åñêèõ è âèðóñîëîãè÷åñêèõ ëàáîðàòîðèÿõ èñïîëüçóþò îáû÷íóþ ëàáîðàòîðíóþ ïîñóäó: öèëèíäðû, êîëáû, ñêëÿíêè äëÿ ðàñòâîðåíèÿ è õðàíåíèÿ ðåàêòèâîâ, õèìè÷åñêèå ïðîáèðêè. Ïîìèìî ýòîãî ñïåöèàëüíóþ ïîñóäó: Ïðîáèðêè - áèîëîãè÷åñêèå- ñ êðóïíûì äíîì, íåðàçâåðíóòûì êðàåì; - öåíòðèôóæíûå- ñóæåíû êíèçó, êîíè÷åñêîé ôîðìû; - ïðåöèïèòàöèîííûå- î÷åíü óçêèå ñ âíóòðåííèì äèàìåòðîì 2-3 ìì Ñòåêëÿííûå ÷àøêè Ïåòðè äëÿ âûðàùèâàíèÿ ìèêðîîðãàíèçìîâ íà ïëîòíûõ ïèòàòåëüíûõ ñðåäàõ. Èõ èçãîòàâëèâàþò èç ïðîçðà÷íîãî ñòåêëà, íå èìåþùåãî êàìíåé, ïóçûðåé. Âûñîòà ÷àøêè 20-30 ìì, äèàìåòð 60-200 ìì. Ïèïåòêè - ãðàäóèðîâàííûå äîëæíû ñîîòâåòñòâîâàòü ïàðàìåòðàì ÃÎÑÒà - ïàñòåðîâñêèå- ñòåêëÿííûå òðóáêè äèàìåòðîì ô-1 ìì, ó êîòîðûõ îäèí, êîíåö îòòÿíóò íàä ïëàìåíåì ãîðåëêè â âèäå êàïèëëÿðà. Ñïåöèàëüíàÿ ëàáîðàòîðíàÿ ïîñóäà äîëæíà áûòü ÷èñòîé è ñòåðèëüíîé. Ìûòüå ïðîèçâîäÿò åðøàìè ñ ìûëîì è ñîäîé. Íîâóþ ïîñóäó ñëåäóåò äî ìûòüÿ ïðîêèïÿòèòü â 1-2% ðàñòâîðå õëîðèñòîâîäîðîäíîé êèñëîòû. Ñóøàò ïîñóäó â ñóøèëüíîì øêàôó. , Ñóõóþ ïîñóäó çàêðûâàþò è ïîìåùàþò â ïåíàëû.  ïðîáèðêè âñòàâëÿþò âàòíûå ïðîáêè è çàâîðà÷èâàþò â ïà÷êè ïî 5-10 øòóê. Ê ÷àøêàì Ïåòðè ïîäáèðàþò êðûøêè è çàâåðòûâàþò ïî îäíîé èëè íåñêîëüêî øòóê. Ïèïåòêè çàêðûâàþò âàòêîé ñ òîãî êîíöà, êîòîðûé áåðóò â ðóêè. Ãîòîâûå ïèïåòêè çàâîðà÷èâàþò â áóìàãó è óêëàäûâàþò â ïåíàëû. Ñòåðèëèçàöèÿ ïðîâîäèòñÿ â ñóõîæèðîâîì øêàôó ïðè òåìïåðàòóðå 180 Ñ â òå÷åíèå 1 ÷àñà. |
question
Ýòàïû ïðèãîòîâëåíèÿ ìàçêà. |
answer
Äëÿ ïðèãîòîâëåíèÿ ìàçêà íåîáõîäèìî èìåòü: • ×èñòîå îáåçæèðåííîå ïðåäìåòíîå ñòåêëî. • Áàêòåðèîëîãè÷åñêóþ ïåòëþ. • Êóëüòóðó, âûðàùåííóþ íà ïëîòíîé ïèòàòåëüíîé ñðåäå- àãàðå, èëè æèäêîé -áóëüîíå. • Ñïèðòîâêó. • Íàáîð êðàñîê. 1. Îáåçæèðåííîå ïðåäìåòíîå ñòåêëî è áàêòåðèîëîãè÷åñêóþ ïåòëþ ïðîæèãàþò â ïëàìåíè ãîðåëêè. Ïðîáèðêó ñ èçó÷àåìîé êóëüòóðîé äåðæàò ìåæäó óêàçàòåëüíûì è áîëüøèì ïàëüöàìè ëåâîé ðóêè. Ïåòëþ áåðóò ïðàâîé ðóêîé, ìèçèíöåì ïðàâîé ðóêè ïðèæèìàþò ïðîáêó ïðîáèðêè ê ëàäîíè. Åñëè ìàçîê ãîòîâèòñÿ ñ æèäêîé ïèòàòåëüíîé ñðåäû, òî êàïëþ êóëüòóðû íàíîñÿò ïåòëåé íà ïðåäìåòíîå ñòåêëî. Åñëè ìàçîê äåëàþò èç êóëüòóðû ñ àãàðà, òî ïåòëþ ñ êóëüòóðîé âíîñÿò íà ïðåäìåòíîå ñòåêëî è äîáàâëÿþò êàïëþ ôèçèîëîãè÷åñêîãî ðàñòâîðà, â êîòîðîì ýìóëüãèðóþò âíåñåííûé ìàòåðèàë. Ïåòëþ îáæèãàþò â ïëàìåíè ãîðåëêè. Ìàçîê äîëæåí áûòü òîíêèì, ðàâíîìåðíî ðàñòåðòûì, îêðóãëîé ôîðìû, ðàçìåðîì 1,5-2ñì.. 2. Âûñóøèâàíèå ìàçêà ïðîèçâîäèòñÿ ïðè êîìíàòíîé òåìïåðàòóðå. 3. Ôèêñàöèÿ ìàçêà ïðîèçâîäèòñÿ ñ öåëüþ: • Óáèòü ìèêðîáíûå êëåòêè. • Îáåñïå÷èòü ëó÷øåå ïðèëèïàíèå ìèêðîáîâ ê ïðåäìåòíîìó ñòåêëó. • Îáåñïå÷èòü äàëüíåéøåå îêðàøèâàíèå. Ôèêñàöèÿ ìàç-êà â ïëàìåíè ãîðåëêè ïðîèçâîäèòñÿ 3-êðàòíî, äåéñòâèå ïëàìåíè äîëæíî äëèòñÿ 2 ñåêóíäû. Äëÿ áîëåå íåæíîé ôèêñàöèè ìàçêîâ êðîâè, ñïèðîõåò è ïðîñòåéøèõ èñïîäüçóþòà õèìè÷åñêèå ôèêñàòîðû: • Ìåòèëîâûé ñïèðò â òå÷åíèè 5-è ìèíóò. • Ýòèëîâûé ñïèðò (96°) â òå÷åíèè 10-è ìèíóò. • Ñìåñü Íèêèôîðîâà —â òå÷åíèè 10-15 ìèíóò. • Àöåòîí - â òå÷åíèè 5-è ìèíóò. • Ïàðû ôîðìàëèíà — â òå÷åíèè íåñêîëüêèõ ñåêóíä. 4. Îêðàñêà ïðåïàðàòîâ ïðîâîäèòñÿ: • Ïðîñòûìè ìåòîäàìè (âîäíûì ôóêñèíîì Ïôåéôôåðà, ìåòèëåíîâîé ñèíüêîé Ëåôôëåðà), êîãäà îêðàøèâàåòñÿ âñÿ êëåòêà è èñïîëüçóåòñÿ òîëüêî îäèí êðàñèòåëü; • Ñëîæíûìè ìåòîäàì, êîãäà îïðåäåëÿþòñÿ êëåòî÷íûå ñòðóêòóðû. Ïîñëå ýêñïîçèöèè ìàçîê ïðîìûâàþò âîäîé, âûñóøèâàþò ôèëüòðîâàëüíîé áóìàãîé è ìèêðîñêîïèðóþò ïîä èììåðñèåé. |
question
Îñíîâíûå ïðàâèëà ìèêðîñêîïèè. |
answer
Ñâåòîâîé ìèêðîñêîï - ýòî îáÿçàòåëüíàÿ ïðèíàäëåæíîñòü ëþáîé ìèêðîáèîëîãè÷åñêîé ëàáîðàòîðèè. Ðàçðåøàþùàÿ ñïîñîáíîñòü ñâåòîâîãî ìèêðîñêîïà 0,2 ìêì. Îáùåå óâåëè÷åíèå ìèêðîñêîïà îïðåäåëÿåòñÿ ïðîèçâåäåíèåì îáúåêòèâà íà óâåëè÷åíèå îêóëÿðà. Ìèêðîñêîïèÿ ñ ñóõèìè îáúåêòèâàìè äàåò óâåëè÷åíèå â 120-600 ðàç. Íåäîñòàòîê: ÷àñòü ëó÷åé îòêëîíÿåòñÿ â ñòîðîíó è íå äîñòèãàåòñÿ õîðîøåå îñâåùåíèå èçó÷àåìîãî îáúåêòà. Èììåðñèîííûå îáúåêòèâû - ýòî îáúåêòèâû, êîòîðûå ïîãðóæàþò â æèäêîñòè (êåäðîâîå ìàñëî, ïåðñèêîâîå ìàñëî). Ïîñêîëüêó ïîêàçàòåëè ïðåëîìëåíèÿ ñòåêëà è èììåðñèîííîãî ìàñëà ïðàêòè÷åñêè îäèíàêîâû 1,52, ñîõðàíÿåòñÿ ÷åòêîñòü è ÿñíîñòü ïîëÿ çðåíèÿ. Ïîëåçíîå óâåëè÷åíèå ìèêðîñêîïà äîñòèãàåò 2000 ðàç. Ñîâðåìåííûé ìèêðîñêîï - ýòî òî÷íûé îïòè÷åñêèé ïðèáîð, ïîýòîìó íåîáõîäèìî ñòðîãî ñîáëþäàòü ðÿä ïðàâèë ïðè ðàáîòå ñ íèìè: 1) èñïîëüçîâàòü ïðàâèëüíîå îñâåùåíèå; 2) õðàíèòü çàêðûòûì îò ïûëè; 3) äëÿ ÷èñòêè îïòè÷åñêèõ ÷àñòåé ïðèìåíÿòü êèñòî÷êó èëè ìÿãêóþ òêàíü, ñìî÷åííóþ âîäîé èëè ñïèðòîì. Ðàç â ãîä ìèêðîñêîï äîëæåí ïðîñìàòðèâàòü ìàñòåð-îïòèê. |
question
Îêðàñêà ìàçêà ïî Öèëü-Íèëüñåíó |
answer
Ìåòîä èñïîëüçóåòñÿ äëÿ îêðàñêè ñïîð è êèñëîóñòîé÷èâûõ áàêòåðèé (ìèêî-áàêòåðèè òóáåðêóëåçà). Êèñëîóñòîé÷èâîñòü ñâÿçàíà ñ íàëè÷èåì â êëåòî÷íîé ñòåíêå ìèêîëîâûõ êèñëîò. Ìåòîä Öèëü-Íèëüñåíà îñíîâàí íà èñïîëüçîâàíèè êîíöåíòðèðîâàííûõ êðàñèòåëåé, ïðîãðåâàíèÿ. Ìåòîäèêà îêðàñêè: 1. Íà' ôèêñèðîâàííûé ìàçîê íàêëàäûâàþò áåëóþ ôèëüòðîâàëüíóþ áóìàãó è íàëèâàþò êàðáîëîâûé ôóêñèí Öèëÿ. Ïðåïàðàò 2-3 ðàçà ïîäîãðåâàþò â ïëàìåíè äî ïîÿâëåíèÿ ïàðîâ. Êàðáîëîâûé ôóêñèí - îñíîâíàÿ êðàñêà; Ïðîãðåâàíèå - ïðîòðàâà. 2 Ïðåïàðàò ïðîìûâàþò âîäîé, áóìàãó ñáðàñûâàþò. 3 Ïðåïàðàò îáåñöâå÷èâàþò â 5% ðàñòâîðå ñåðíîé êèñëîòû. 4 Ïðîìûâàþò âîäîé. Ñåðíàÿ êèñëîòà - îáåñöâå÷èâàþùèé ôàêòîð. 5 Äîêðàøèâàþò ñèíüêîé Ëåôôëåðà 3-5 ìèíóò. Ñèíüêà Ëåôôëåðà - äîïîëíèòåëüíàÿ êðàñêà. 6 Ïðîìûâàþò âîäîé, âûñóøèâàþò, ñìîòðÿò ïîä èììåðñèåé. Êèñëîóñòîé÷èâûå áàêòåðèè è ñïîðû, ðóáèíîâî-êðàñíîãî öâåòà, à îñòàëüíàÿ ìèêðîôëîðà- ñèíåãî öâåòà. |
question
Îïðåäåëåíèå ïîäâèæíîñòè ìèêðîîðãàíèçìîâ ìåòîäàìè «ðàçäàâëåííîé êàïëè» è «âèñÿ÷åé êàïëè» |
answer
Æãóòèêè ÿâëÿþòñÿ îðãàíàìè äâèæåíèÿ áàêòåðèé, ñîñòîÿò èç áåëêà ôëàãåëëèíà. Ïî êîëè÷åñòâó è õàðàêòåðó ðàñïîëîæåíèÿ æãóòèêîâ ðàçëè÷àþò áàêòåðèè: ìîíî-òðèõè, ëîôîòðèõè, àìôèòðèõè è ïåðèòðèõè. Æãóòèêè îáëàäàþò àíòèãåííûìè ñâîéñòâàìè (Í-àíòèãåí) è äàþò âîçìîæíîñòü áàêòåðèÿì ïåðåìåùàòüñÿ â æèäêîé ñðåäå. Î íàëè÷èè æãóòèêîâ ìîæíî íóäèòü ïî õàðàêòåðó äâèæåíèÿ áàêòåðèé â «ðàçäàâëåííîé» è «âèñÿ÷åé» êàïëÿõ ïðè îïóùåííîì êîíäåíñîðå è ÷àñòè÷íî ïðèêðûòîé äèàôðàãìå ìèêðîñêîïà. Ìåòîä «ðàçäàâëåííîé êàïëè». Êóëüòóðó â èçîòîíè÷åñêîì ðàñòâîðå õëîðèäà íàòðèÿ íàíîñÿò íà ïðåäìåòíîå ñòåêëî è ñâåðõó íàêëàäûâàþò ïîêðîâíîå. Êàïëÿ ìàòåðèàëà äîëæíà áûòü òàêîé âåëè÷èíû, ÷òîáû îíà çàïîëíÿëà âñå ïðîñòðàíñòâî ìåæäó ïîêðîâíûì è ïðåäìåòíûì ñòåêëîì è íå âûñòóïàëà çà ïðåäåëû ïîêðîâíîãî. Ïðåïàðàò ðàññìàòðèâàþò ñ èììåðñèîííîé ñèñòåìîé è ñëåãêà îïóùåííûì êîíäåíñîðîì. 10 Ìåòîä «âèñÿ÷åé êàïëè». Íåîáõîäèìî èìåòü ïðåäìåòíîå ñòåêëî ñ ëóíî÷êîé. Êàïëþ êóëüòóðû íàíîñÿò íà ïîêðîâíîå ñòåêëî, ñâåðõó íàêëàäûâàþò ïðåäìåòíîå ñòåêëî ñ ëóíî÷êîé ïîñåðåäèíå, êðàÿ êîòîðîãî ïðåäâàðèòåëüíî îáìàçàíû âàçåëèíîì. Çàòåì ïðåäìåòíîå ñòåêëî ñëåãêà ïðèæèìàþò ê ïîêðîâíîìó, è ïðåïàðàò ïåðåâîðà÷èâàþò ïîêðîâíûì ñòåêëîì êâåðõó. Ïîëó÷àåòñÿ ãåðìåòè÷íî çàêðûòàÿ êàìåðà, â êîòîðîé êàïëÿ äîëãî íå âûñûõàåò. |
question
Ýòàïû ïðèãîòîâëåíèÿ ïèòàòåëüíûõ ñðåä |
answer
Ê îñíîâíûì ïèòàòåëüíûì ñðåäàì, ïðèìåíÿåìûì äëÿ êóëüòèâèðîâàíèÿ áîëüøèíñòâà âèäîâ áàêòåðèé îòíîñÿòñÿ ìÿñî-ïåïòîííûé áóëüîí è ìÿñî-ïåïòîííûé àãàð. Ïðèãîòîâëåíèå ìÿñî-ïåïòîííîãî áóëüîíà (ÌÏÁ) Ïåðâûé ýòàï- ïîëó÷åíèå ìÿñíîé âîäû. Ìÿñî, î÷èùåííîå îò æèðà è îò ñóõîæèëèé, ïðîïóñêàþò ÷åðåç ìÿñîðóáêó, çàëèâàþò äâîéíûì êîëè÷åñòâîì õîëîäíîé âîäîïðîâîäíîé âîäû è íàñòàèâàþò â òå÷åíèå ñóòîê â ïðîõëàäíîì ìåñòå. Çàòåì ìÿñíîé íàñòîé âìåñòå ñ ìÿñîì êèïÿòÿò â òå÷åíèå ÷àñà, ïîñëå ÷åãî îñòóæàþò, ôèëüòðóþò, äîëèâàþò âîäîïðîâîäíîé âîäîé äî ïåðâîíà÷àëüíîãî îáúåìà, ðàçëèâàþò ïî áóòûëÿì è ñòåðèëèçóþò ïðè äàâëåíèè 1 àòì. 30 ìèíóò. Ìÿñíàÿ âîäà ñîäåðæèò ìèíåðàëüíûå âåùåñòâà, óãëåâîäû, âèòàìèíû. Âòîðîé ýòàï- ê ìÿñíîé âîäå ïðèáàâëÿþò 1% ñóõîãî ïåïòîíà è 0,5% õëîðèäà íàòðèÿ, êèïÿòÿò, óñòàíàâëèâàþò ðÍ 20% ðàñòâîðîì åäêîãî íàòðà. Ïðèãîòîâëåíèå ìÿñî-ïåïòîííîãî àãàðà (ÌÏÀ) Ê ìÿñî-ïåïòîííîìó áóëüîíó äîáàâëÿþò 2% ìîðñêîé âîäîðîñëè àãàð-àãàðà, êîòîðûé ïëàâèòñÿ ïðè 100°Ñ è çàòâåðäåâàåò ïðè êîìíàòíîé òåìïåðàòóðå. Ïîñëå ñòåðèëèçàöèè â àâòîêëàâå ìÿñî-ïåïòîííûé àãàð, ðàçëèòûé â ïðîáèðêè, îñòàâëÿþò çàñòûòü ñòîëáèêîì èëè ãîòîâÿò ñêîøåííûé àãàð, óêëàäûâàÿ ïðîáèðêè â íàêëîííîì ïîëîæåíèè ïîä óãëîì 20°. |
question
Ïðàâèëà ïîñåâà íà æèäêèå ïèòàòåëüíûå ñðåäû |
answer
Ïîñåâ èç ïðîáèðêè â ïðîáèðêó Îáå ïðîáèðêè äåðæàò â ëåâîé ðóêå ñëåãêà íàêëîííî, ïðè÷åì ïðîáèðêó ñ ïîñåâíûì ìàòåðèàëîì äåðæàò áëèæå ê ñåáå.  ïðàâîé ðóêå, êàê ïèñ÷åå ïåðî äåðæàò áàêòåðèàëüíóþ ïåòëþ è ïðîêàëèâàþò åå âåðòèêàëüíî â ïëàìåíè ãîðåëêè. Ìèçèíöåì è êðàåì ëàäîíè ïðàâîé ðóêè âûíèìàþò îäíîâðåìåííî ïðîáêè èç îáåèõ ïðîáèðîê, êðàÿ ïðîáèðîê îáæèãàþò â ïëàìåíè ãîðåëêè. Ïðîêàëåííîé ïåòëåé íàáèðàþò íåìíîãî ïîñåâíîãî ìàòåðèàëà è âíîñÿò â ïðîáèðêó ñ æèäêîé ñðåäîé. Íåîáõîäèìî ñëåäèòü çà òåì, ÷òîáû ñðåäà íå âûëèâàëàñü è íå êàñàëàñü ïðîáêè. Ïîñëå ïîñåâà ïåòëþ èçâëåêàþò èç ïðîáèðêè, êðàÿ ïðîáèðêè îáæèãàþò è, ïðîâåäÿ ïðîáêó ÷åðåç ïëàìÿ ãîðåëêè, çàêðûâàþò ïðîáèðêó, ïîñëå ÷åãî ïðîêàëèâàþò ïåòëþ. Ïîñåâ æèäêîãî 11 ìàòåðèàëà ìîæíî ïðîèçâîäèòü ñòåðèëüíûìè ïàñòåðîâñêèìè èëè ãðàäóèðîâàííûìè ïèïåòêàìè. Ïðîáèðêè ñ çàñåÿííîé êóëüòóðîé ýòèêèðóþò è ïîìåøàþò â òåðìîñòàò. 13. - Ïðàâèëà ïîñåâà íà ïëîòíûå ïèòàòåëüíûå ñðåäû Ïîñåâ â ÷àøêó Ïåòðè øïàòåëåì ** Ëåâîé ðóêîé ïðèîòêðûâàþò êðûøêó. Ìàòåðèàë íàáèðàþò, ïåòëåé èëè óâ ïèïåòêó, íàíîñÿò íà ïîâåðõíîñòü ÌÏÀ è âòèðàþò øïàòåëåì' ïî âñåé ïîâåðõíîñòè àãàðà. Ïðè ïîñåâå ìàòåðèàëà, îáèëüíî îáñåìåíåííîãî ìèêðîôëîðîé, èñïîëüçóþò 2-3 ÷àøêè äëÿ ïîñëåäîâàòåëüíîãî ïîñåâà. Ïîñåâ â ïðîáèðêó ïåòëåé Ïîëó÷åííûå èçîëèðîâàííûå êîëîíèè ñëóæàò äëÿ âûäåëåíèÿ ÷èñòîé êóëüòóðû ìèêðîáà. Îñòîðîæíî ïðèïîäíÿâ êðûøêó ÷àøêè, çàõâàòûâàþò ïðîêàëåííîé è îñòóæåííîé ïåòëåé îäíó îòäåëüíî ðàñïîëîæåííóþ êîëíèþ è âíîñÿò â ïðîáèðêó ñ ïëîòíîé ïèòàòåëüíîé ñðåäîé. Ïðîáèðêó äåðæàò â íàêëîííîì ïîëîæåíèè â ëåâîé ðóêå ìåæäó áîëüøèì è óêàçàòåëüíûì ïàëüöàìè. Ïðàâîé ðóêîé äåðæàò ïåòëþ ñ ïîñåâíûì ìàòåðèàëîì. Ìèçèíöåì, ìÿêîòüþ ëàäîíè ïðàâîé ðóêè âûíèìàþò ïðîáêó èç ïðîáèðêè, îáæèãàþò â ïëàìåíè ãîðåëêè åå êðàé è âíîñÿò â íåå ïåòëþ, ïîñåâ ïðîèçâîäÿò: [ à) øòðèõàìè íà ïîâåðõíîñòè àãàðà; á) óêîëîì â ñòîëáèê àãàðà. : Ïðè ïîñåâàõ è ïåðåñåâàõ âíèìàíèå ðàáîòàþùåãî äîëæíî áûòü îáðàùåíî íà ñîáëþäåíèå ïðàâèë ñòåðèëüíîñòè: ÷òîáû ñ îäíîé ñòîðîíû íå çàãðÿçíÿòü ñâîè ïîñåâû ïîñòîðîííåé.ìèêðîôëîðîé, à ñ äðóãîé - íå ÿâëÿòüñÿ èñòî÷íèêîì èíôåêöèè äëÿ îêðóæàþùèõ. |
question
Ìåòîäû êóëüòèâèðîâàíèÿ àíàýðîáîâ |
answer
Ñóùíîñòü óñëîâèé, íåîáõîäèìûõ äëÿ êóëüòèâèðîâàíèÿ àíàýðîáîâ, çàêëþ÷àåòñÿ â ñíèæåíèè ïàðöèàëüíîãî äàâëåíèÿ ìîëåêóëÿðíîãî êèñëîðîäà. Ìåõàíè÷åñêèå ìåòîäû: 1. ã Ïîñåâ óêîëîì â ñòîëáèê ñàõàðíîãî àãàðà. 2. Ìåòîä Âèíüÿë-Âåéîíà: â ðàñïëàâëåííûé è îñòóæåííûé äî 50°Ñ àãàð âíîñÿò èññëåäóåìóþ àíàýðîáíóþ êóëüòóðó, ïåðåìåøèâàþò è çàñàñûâàþò â ïàñòåðîâñêóþ ïèïåòêó, êîíåö êîòîðîé çàïàèâàþò. ×åðåç 24-48 â ñòîëáèêå àãàðà âûðàñòàþò ÿñíî âèäèìûå êîëîíèè ìèêðîáîâ-àíàýðîáîâ. 3. Ìåòîä Ïåðåòöà. Èññëåäóåìûé ìàòåðèàë âíîñÿò â 3 ïðîáèðêè ñ ôèçèîëîãè÷åñêèì ðàñòâîðîì, à çàòåì â 3 ïðîáèðêè ñ îñòóæåííûì äî 50°Ñ ÌÏÀ. Ñîäåðæèìîå ïðîáèðîê ïåðåìåøèâàþò è âûëèâàþò â 3 ñòåðèëüíûå ÷àøêè Ïåòðè, íà äíî êîòîðûõ ïðåäâàðèòåëüíî êëàäóò ñòåðèëüíîå ïðåäìåòíîå ñòåêëî, ÷åðåç 18-20 ÷àñîâ èíêóáàöèè â òåðìîñòàòå ïîä ïëàñòèíêàìè ñòåêëà âûðàñòàþò àíàýðîáû. 12 Ôèçè÷åñêèå ìåòîäû: 1. Àíàýðîñòàò'- ñîçäàíèå âàêóóìíûé óñëîâèé. 2. Àïïàðàò Êèïïà - çàìåíà âîçäóõà èíäèôôåðåíòíûì ãàçîì (âîäîðîäîì). 3. Ñðåäà Êèò-Òàðîööè — ñîäåðæèò êóñî÷êè ïå÷åíè, îáëàäàþùèå âûñîêîé àäñîðáöèîííîé ñïîñîáíîñòüþ, 0,5% ãëþêîçû. Ïåðåä ïîñåâîì ñðåäó êèïÿòÿò íà âîäÿíîé áàíå íå ìåíåå 15 ìèíóò, ñâåðõó çàëèâàþò ñëÜåì âàçåëèíîâîãî ìàñëà, ÷òîáû ïðåäîõðàíèòü ïîñåâ îò ïðîíèêíîâåíèÿ êèñëîðîäà. Õèìè÷åñêèå ìåòîäû: 1. Ïðèáîð Îìåëÿíñêîãî - äëÿ ïîãëîùåíèÿ êèñëîðîäà èñïîëüçóåòñÿ ïèðîãàëëîë. 2. Ñðåäà Âèëüñîí-Áëåðà. Ñîäåðæèò ãëþêîçó, ñåðíèñòî-êèñëûé íàòðèé, õëîðèä æåëåçà. Àíàýðîáû îáðàçóþò ÷åðíûå êîëîíèè çà ñ÷åò âîññòàíîâëåíèÿ ñåðíèñòî-êèñëîãî íàòðèÿ â ñåðíèñòûé íàòðèé, êîòîðûé, ñîåäèíÿÿñü ñ õëîðèäîì æåëåçà, îáðàçóåò îñàäîê ÷åðíîãî öâåòà - ñåðíèñòîå æåëåçî. Áèîëîãè÷åñêèé ìåòîä Ôîðòíåðà ×àøêó Ïåòðè ñ òîëñòûì ñëîåì àãàðà äåëÿò íà 2 ïîëîâèíû, íà îäíó ïîëîâèíó çàñåâàþò îáëèãàòíûé àíàýðîá — «÷óäåñíóþ» ïàëî÷êó, íà äðóãóþ ïîëîâèíó ÷àøêè çàñåâàþò èññëåäóåìóþ àíàýðîáíóþ êóëüòóðó. ×àøêó çàëèâàþò ðàñòîïëåííûì ïàðàôèíîì. ×åðåç 24-48 ÷àñîâ â ÷àøêå âûðàñòàþò àýðîáû, çàòåì, êîãäà çàïàñ êèñëîðîäà èñ÷åðïûâàåòñÿ, íà÷èíàþò ðàçìíîæàòñÿ àíàýðîáû. |
question
Âûäåëåíèå ÷èñòîé êóëüòóðû àíàýðîáîâ ìåõàíè÷åñêèå è áèîëîãè÷åñêèå ìåòîäû |
answer
×èñòàÿ êóëüòóðà — ýòî ïîïóëÿöèÿ ìèêðîîðãàíèçìîâ îäíîãî âèäà. Äëÿ âûäåëåíèÿ ÷èñòîé êóëüòóðû àýðîáîâ èñïîëüçóþò ìåòîäû, îñíîâàííûå íà: 1. Ìåõàíè÷åñêîì ðàçîáùåíèè áàêòåðèàëüíûõ êëåòîê • Ìåòîä Äðèãàëüñêîãî - ðàñïðåäåëåíèå êàïëè ñóñïåíçèè ìàòåðèàëà ñ ïîìîùüþ øïàòåëÿ; • Ðàññåâ øòðèõîì; • Ìåòîä Êîõà ÿâëÿåòñÿ êîëè÷åñòâåííûì è ïîçâîëÿåò îïðåäåëèòü êîëè÷åñòâî áàêòåðèé â èññëåäóåìîì ìàòåðèàëå 2. Áèîëîãè÷åñêèå ìåòîäû: • Ïîñåâ íà ýëåêòèâíûå ñðåäû; • Ìåòîä Øóêåâè÷à - ïîñåâ ìàòåðèàëà â êîíäåíñàò ñêîøåííîãî ÌÏÀ äëÿ âûäåëåíèÿ ÷èñòûõ êóëüòóð áàêòåðèé, îáëàäàþùèõ ïîëçó÷èì ðîñòîì (íàïðèìåð, ïðîòåé); • Îáðàáîòêà êèñëîòàìè è ùåëî÷àìè (íàïðèìåð, ìèêîáàêòåðèè òóáåðêóëåçà); • Ïðîãðåâàíèå ïðè 80°Ñ äëÿ âûäåëåíèÿ ñïîðîâûõ ôîðì; • Çàðàæåíèå ëàáîðàòîðíûõ æèâîòíûõ - äëÿ äèàãíîñòèêè çîîíîçîâ è äð. (òóëÿðåìèÿ). Ìåòîä Äðèãàëüñêîãî îñíîâàí íà ìåõàíè÷åñêîì ðàçîáùåíèè íà ïîâåðõíîñòè ïëîòíîé, ïèòàòåëüíîé ñðåäû ìèêðîáîâ âñåõ âèäîâ, âõîäÿùèõ â ñîñòàâ èññëåäóåìîãî ìàòåðèàëà. I ýòàï. 1. Îïðåäåëåíèå ìèêðîáíîãî ñîñòàâà èññëåäóåìîãî ìàòåðèàëà (ïðèãîòîâëåíèå ìàçêà* îêðàñêà ïî Ãðàìó). v 2. Ïîñåâ íà ÷àøêó Ïåòðè: îäíó êàïëþ ìàòåðèàëà íàíîñÿò íà ïîâåðõíîñòü ÌÏÀ è ðàñòèðàþò øïàòåëåì. Íå îáæèãàÿ øïàòåëÿ è íå íàáèðàÿ íîâîãî ìàòåðèàëà, çàñåâàþò âòîðóþ è òðåòüþ ÷àøêè. 3. Çàñåÿííûå ÷àøêè ïåðåâîðà÷èâàþò ââåðõ äíîì è èíêóáèðóþò â òåðìîñòàòå 18-20 ÷àñîâ ïðè òåìïåðàòóðå 37°Ñ. II ýòàï. 1. Ìàêðîñêîïè÷åñêîå èçó÷åíèå êîëîíèé ïî âåëè÷èíå, ôîðìå, îêðàñêå, õàðàêòåðó ïîâåðõíîñòè, êðàåâ, êîíñèñòåíöèè. . 2. Ìèêðîñêîïè÷åñêîå èçó÷åíèå îäíîé èññëåäóåìîé êîëîíèè (ïðèãîòîâëåíèå ìàçêà, îêðàñêà ïî Ãðàìó). 3. Îñòàâøóþñÿ ÷àñòü êîëîíèè ïåðåñåâàþò â ïðîáèðêó ñî ñêîøåííûì àãàðîì. 4. Ïðîáèðêó èíêóáèðóþò â òåðìîñòàòå 18-20 ÷àñîâ ïðè òåìïåðàòóðå 37°Ñ. III ýòàï. Ïðîâåðêà êóëüòóðû íà ÷èñòîòó (ìàêðîñêîïè÷åñêèì - îäíîðîäíûé ðîñò, ìèêðîñêîïè÷åñêèì — îäíîðîäíûå ïî ìîðôîëîãè÷åñêèì ïðèçíàêàì è òèíêòîðèàëüíûì ïðèçíàêàìè êëåòêè). IV ýòàï. Èäåíòèôèêàöèÿ ïðîâîäèòñÿ ïî: - ôåðìåíòàòèâíûì ñâîéñòâàì. - àíòèãåííûì ñâîéñòâàì, òîêñèãåííîñòè è äðóãèì ïðèçíàêàì - ôàãî÷óâñòâèòåëüíîñòè |
question
Âûäåëåíèå ÷èñòîé êóëüòóðû àíàýðîáîâ |
answer
I ýòàï — îáîãàùåíèå íà ñðåäå Êèòò-Òàðîööè, ïðåäâàðèòåëüíî ïðîêèïÿ÷åííîé â òå÷åíèå 30 ìèíóò. Ïîñëå ïîñåâà ñðåäó ïðîãðåâàþò 15 ìèíóò ïðè 80°Ñ äëÿ óíè÷òîæåíèÿ âåãåòàòèâíûõ ôîðì, ñïîðû àíàýðîáîâ ïðè ýòîì ñîõðàíÿþòñÿ. II ýòàï - ïîëó÷åíèå èçîëèðîâàííûõ êîëîíèé. Íà ñðåäå Êèòò-Òàðîööè îáíàðóæèâàåòñÿ ïîìóòíåíèå ñ ïóçûðüêàìè ãàçà. Ø ýòàï - âûäåëåíèå ÷èñòîé êóëüòóðû ïðîâîäèòñÿ ïî îäíîìó èç ñëåäóþùèõ ìåòîäîâ: À) Ïî Öåéññëåðó - êàïëþ ìàòåðèàëà ñî ñðåäû Êèòò-Òàðîööè çàñåâàþò â ÷àøêó ñ êðîâÿíûì àãàðîì è ðàñïðåäåëÿþò ìàòåðèàë øïàòåëåì, ýòèì æå øïàòåëåì ïðîèçâîäÿò ïîñåâ âî âòîðîé è òðåòüåé ÷àøêàõ; Á) Ïî Âåéíáåðãó - êàïëþ ìàòåðèàëà ñî ñðåäû Êèòò-Òàðîööè ïåðåíîñÿò â ðàñòîïëåííûé è ñëåãêà îñòóæåííûé ñàõàðíûé àãàð, çàòåì íàáèðàþò â òðóáêè Âåíüÿë-Âåéîíà è èíêóáèðóþò â òåðìîñòàòå. IV è V ýòàïû - èäåíòèôèêàöèÿ â ðåàêöèè íåéòðàëèçàöèè íà áåëûõ ìûøàõ. |
question
Çàðàæåíèå êóðèíîãî ýìáðèîíà |
answer
Êóðèíûé ýìáðèîí èñïîëüçóåòñÿ äëÿ êóëüòèâèðîâàíèÿ âèðóñîâ, ìèêîïëàçì. Èñïîëüçóþò ýìáðèîíû â âîçðàñòå 8-14 äíåé â çàâèñèìîñòè îò âèäà âèðóñà è ñïîñîáà çàðàæåíèÿ: íà õîðèîí-àëëàíòîèñíóþ îáîëî÷êó, â àëëàíòîèñíóþ è àìíèîòè÷åñêóþ ïîëîñòü, â æåëòî÷íûé ìåøîê. Ïåðåä çàðàæåíèåì îïðåäåëÿþò æèçíåñïîñîáíîñòü ýìáðèîíà â îâîñêîïå è îòìå÷àþò êàðàíäàøîì íà ñêîðëóïå ãðàíèöû âîçäóøíîãî ìåøêà. Çàðàæåíèå êóðèíûõ ýìáðèîíîâ ïðîèçâîäÿò â áîêñå â ñòðîãî àñåïòè÷åñêèõ óñëîâèÿõ, ïîëüçóÿñü èíñòðóìåíòîì, ñòåðèëèçîâàííûì êèïÿ÷åíèåì. 1ýòàï Ñêîðëóïó íàä âîçäóøíûì ïðîñòðàíñòâîì ïðîòèðàþò ñïèðòîì, îáæèãàþò â ïëàìåíè, ñìàçûâàþò 2% ðàñòâîðîì éîäà, ñíîâà ïðîòèðàþò ñïèðòîì è îáæèãàþò. Âèðóñíûé ìàòåðèàë â êîëè÷åñòâå 0,05 - 0,2 ìë íàíîñÿò íà õîðèîí-àëëàíòîèñíóþ îáîëî÷êó òóáåðêóëèíîâûì øïðèöîì èëè ïàñòåðîâñêîé ïèïåòêîé. II ýòàï Âñêðûòèå ýìáðèîíîâ ïðîâîäÿò ÷åðåç 48-72 ÷àñà èíêóáàöèè â òåðìîñòàòå. Íàëè÷èå âèðóñà â õîðèîí-àëëàíòîèñíîé îáîëî÷êå îïðåäåëÿþò: 1. ïî áåëåñîâàòûì íåïðîçðà÷íûì ïÿòíàì ðàçíîé ôîðìû; 2. â ðåàêöèè ãåìàããëþòèíàöèè. |
question
Îêðàñêà ìàçêà ïî Ãðàìó |
answer
Ìåòîä Ãðàìà ââåäåí â 1884 ãîäó äàòñêèì ìèêðîáèîëîãîì Ãàíñîì Õðèñòèàíîì Ãðàìîì è ÿâëÿåòñÿ âàæíûì òàêñîíîìè÷åñêèì ïðèçíàêîì. Ê ãðàìïîëîæèòåëüíûì áàêòåðèÿì îòíîñÿòñÿ òå, ó êîòîðûõ êîìïëåêñ, îáðàçóåìûé ãåíöèàíâèîëåòîì è éîäîì, óäåðæèâàåòñÿ ïðè îáðàáîòêå ñïèðòîì. Ãðàìîòðèöàòåëüíûìè íàçûâàþò òå áàêòåðèè, êîòîðûå íå îáëàäàþò ñâîéñòâîì óäåðæèâàòü êîìïëåêñ è îáåñöâå÷èâàþòñÿ ïðè îáðàáîòêå ñïèðòîì. Ñïîñîáíîñòü èëè íåñïîñîáíîñòü êëåòîê óäåðæèâàòü êîìïëåêñ ãåíöèàíâåîëåòà ñ éîäîì ñâÿçûâàþò ñ ðàçëè÷íûì ñîñòàâîì è ñòðóêòóðîé êëåòî÷íîé ñòåíêè áàêòåðèé. Ìåòîäèêà îêðàñêè. 1 .Íà ôèêñèðîâàííûé ìàçîê íàêëàäûâàþò ôèëüòðîâàëüíóþ áóìàãó, ïðîïèòàííóþ ãåíöèàíâèîëåòîì è íàíîñÿò êàïëþ âîäû íà 2 ìèíóòû. Ãåíöèàíâèîëåò îñíîâíàÿ êðàñêà. 2. Áóìàãó ñáðàñûâàþò è, íå ïðîìûâàÿ âîäîé, íàëèâàþò ðàñòâîð Ëþãîëÿ íà 1 ìèíóòó. Ðàñòâîð Ëþãîëÿ ïðîòðàâà: óñèëèâàåò äåéñòâèå îñíîâíîé êðàñêè ó ãðàìïîëîæèòåëüíûõ áàêòåðèé. 15 3. Ïðåïàðàò îáåñöâå÷èâàþò 3-5 êàïëÿìè ñïèðòà â òå÷åíèå ÇÎñåêóíä äî ïðåêðàùåíèÿ îòõîæäåíèÿ ôèîëåòîâûõ ñòðóåê êðàñêè. Ñïèðò îáåñöâå÷èâàþùèé ôàêòîð. 4. Ïðîìûâàþò âîäîé. 5. Äîêðàøèâàþò âîäíûì ôóêñèíîì Ïôåéôôåðà â òå÷åíèå 1-2 ìèíóò. Âîäíûé ôóêñèí äîïîëíèòåëüíàÿ êðàñêà. Ãðàìïîëîæèòåëü-íûå áàêòåðèè (êîêêè) ñèíå-ôèîëåòîâîãî öâåòà, ãðàìîòðèöàòåëüíûå (ïàëî÷êîâèäíûå ôîðìû) ðîçîâîãî öâåòà. 6. Ïðîìûâàþò âîäîé, âûñóøèâàþò ôèëüòðîâàëüíîé áóìàãîé è ìèêðîñêîïèðóþò ïîä èììåðñèåé. |
question
Ïîñòàíîâêà ñåðîëîãè÷åñêèõ ðåàêöèé - ÐÀ íà ñòåêëå. |
answer
Ðåàêöèÿ øèðîêî ïðèìåíÿåòñÿ äëÿ ñåðîëîãè÷åñêîé èäåíòèôèêàöèè âûäåëåííûõ ìèêðîáîâ, à òàêæå ïðè ïîñòàíîâêå óñêîðåííûõ ñåðîëîãè÷åñêèõ ðåàêöèé. Ïîñòàíîâêà ðåàêöèè: Ïàñòåðîâñêîé ïèïåòêîé íàíîñÿò íà ïðåäìåòíîå ñòåêëî êàïëþ ñûâîðîòêè â íóæíûõ ðàçâåäåíèÿõ.  êàæäóþ êàïëþ ñûâîðîòêè âíîñÿò ïåòëþ 24-÷àñîâîé àãàðîâîé æèâîé êóëüòóðû èëè êàïëþ äèàãíîñòèêóìà. Ïîñòàíîâêà ðåàêöèè äîëæíà ñîïðîâîæäàòüñÿ êîíòðîëåì àíòèãåíà è êîíòðîëåì ñûâîðîòêè. Ó÷åò ðåàêöèè ïðîèçâîäÿò ÷åðåç 5-10 ìèíóò. Êîìïîíåíòû: 1. Àíòèãåíû íåèçâåñòíîãî âèäà; 2. Èçâåñòíàÿ èììóííàÿ ñûâîðîòêà; 3. Ôèçèîëîãè÷åñêèé ðàñòâîð. |
question
Ïîäãîòîâêà è ó÷åò îáúåìíîé ÐÀ |
answer
à) ðåàêöèÿ Âèäàëÿ Ðåàêöèÿ àããëþòèíàöèè øèðîêî ïðèìåíÿåòñÿ â ëàáîðàòîðíîé ïðàêòèêå äëÿ ñåðîäèàãíîñòèêè. Ðåàêöèÿ àããëþòèíàöèè ïðîòåêàåò â äâå ôàçû: 1 ôàçà - ñîåäèíåíèå àíòèãåíà ñ àíòèòåëîì; 2 ôàçà - àäñîðáöèÿ íà êîìïëåêñå àíòèãåí+àíòèòåëî ôèçèîëîãè÷åñêîãî ðàñòâîðà è âûïàäåíèå îñàäêà äâóõ âèäîâ: à) êðóïíîõëîï÷àòîãî - ó æãóòèêîâûõ áàêòåðèé (Í-àããëþòèíàöèÿ); á) ìåëêîçåðíèñòîãî - àããëþòèíàò îáðàçóåòñÿ â âèäå êîìïàêòíûõ çåðåí (Î-àããëþòèíàöèÿ). Êîìïîíåíòû ðåàêöèè Âèäàëÿ: 16 1) èñïûòóåìàÿ ñûâîðîòêà â ðàçâåäåíèÿõ 1:100, 1:200, 1:400, 1:800, 1:1600; 2) äèàãíîñòèêóìû - âçâåñü óáèòûõ ñàëüìîíåëë òðåõ âèäîâ: áðþøíîãî òèôà, ïàðàòèôà À è Â; 3) ôèçèîëîãè÷åñêèé ðàñòâîð. Öåëü ðåàêöèè: îïðåäåëåíèå òèòðà àíòèòåë â èñïûòóåìîé ñûâîðîòêå. Ðåàêöèÿ àããëþòèíàöèè äîëæíà ñîïðîâîæäàòüñÿ êîíòðîëåì àíòèãåíà è ñûâîðîòêè. Ðåàêöèÿ ñòàâèòñÿ â òðåõ ðÿäàõ. Ó÷åò ðåçóëüòàòîâ ïðîâîäÿò ÷åðåç 18-20 ÷àñîâ. Ñòåïåíü ïîëîæèòåëüíîé ðåàêöèè àããëþòèíàöèè îáîçíà÷àåòñÿ ïëþñàìè: + + + + ïîëíàÿ àããëþòèíàöèÿ + + + íåïîëíàÿ àããëþòèíàöèÿ + + ñëàáàÿ àããëþòèíàöèÿ - îñàäêà íåò (îòðèöàòåëüíàÿ ðåàêöèÿ) á) ðåàêöèÿ Âåéãëÿ Ñòàâèòñÿ ñ 8 äíÿ áîëåçíè ïðè ñûïíîì òèôå è áîëåçíè Áðèëëÿ-Öèíññåðà äëÿ îáíàðóæåíèÿ àíòèòåë â èñïûòóåìîé ñûâîðîòêå êðîâè. Êîìïîíåíòû ðåàêöèè Âåéãëÿ: 1) èñïûòóåìàÿ ñûâîðîòêà â ðàçâåäåíèÿõ 1:50, 1:100, 1:200, 1:400, 1:800; 2) ðèêêåòñèîçíûé äèàãíîñòèêóì - âçâåñü óáèòûõ ðèêêåòñèé Ïðîâà÷åêà 3) ôèçèîëîãè÷åñêèé ðàñòâîð Ðåàêöèÿ ïðèìåíÿåòñÿ ïðè ðåöèäèâàõ ýïèäåìè÷åñêîãî ñûïíîãî òèôà (áîëåçíè Áðèëëÿ-Öèíññåðà), îáóñëîâëåííûõ ðåàêòèâàöèåé ðèêêåòñèé Ïðîâà÷åêà â ñûïíîòèôîçíûõ ãðàíóëåìàõ. |
question
Îïñîíî-ôàãîöèòàðíàÿ ðåàêöèÿ |
answer
Ìåõàíèçì: óñèëåíèå ôàãîöèòîçà ìèêðîáíûõ êëåòîê ïîä âëèÿíèåì ñîäðóæåñòâåííîãî âîçäåéñòâèÿ àíòèòåë, èììóííîé ñûâîðîòêè è êîìïëåìåíòà. Êîìïîíåíòû ðåàêöèè: 1) àíòèãåí - ñóòî÷íàÿ ìèêðîáíàÿ êóëüòóðà; 2) èñïûòóåìàÿ ñûâîðîòêà áîëüíîãî; 3) êîìïëåìåíò - ñâåæàÿ ñûâîðîòêà ìîðñêîé ñâèíêè; 4) ôàãîöèòû - ëåéêîöèòàðíàÿ âçâåñü. Îïñîíèíû - ýòî àíòèòåëà, êîòîðûå ñîäåðæàòñÿ â íîðìàëüíûõ è èììóííûõ ñûâîðîòêàõ è ïîäãîòàâëèâàþò ìèêðîáû ê ôàãîöèòîçó. 24 Ðåàêöèÿ ñòàâèòñÿ â ñïåöèàëüíûõ ïðîáèðêàõ ïðè t=37°» ìèíóò. Çàòåì èç êàæäîé ïðîáèðêè ãîòîâÿò ìàçêè, ñ÷èòàþò ïî, 100 ôàãîöèòîâ è îïðåäåëÿþò ÷èñëî ôàãîöèòèðîâàííûõ ìèêðñ êîíòðîëå. Îïñîíè÷åñêèé èíäåêñ = ôàãîöèòàðíûé ïîêàçàòå. ñûâîðîòêè/ôàãîöèòàðíûé ïîêàçàòåëü íîðìàëüíîé ñûâîðîï ×åì âûøå îïñîíè÷åñêèé èíäåêñ (äîëæåí áûòü >1), èññëåäóåìàÿ ñûâîðîòêà, è, ñëåäîâàòåëüíî, òåì âûøå èì! áðóöåëëåçå). |
question
Ðåàêöèÿ òîðìîæåíèÿ ãåì-ÀÃ |
answer
Ýòà ðåàêöèÿ ïðèìåíÿåòñÿ â âèðóñîëîãè÷åñêîé ïðàêòèêå: - äëÿ îïðåäåëåíèÿ òèïà âèðóñà (íà ñòåêëå); - äëÿ îáíàðóæåíèÿ â ñûâîðîòêå áîëüíûõ (ðàçâåðíóòàÿ). Ïðè ïîñòàíîâêå îðèåíòèðîâî÷íîé ðåàêöèè òîðìîæåíèÿ ãåìàããëþòèíàöèè íà ñòåêëî íàíîñÿò ïî 1 êàïëå òèïîñïåöèôè÷åñêèõ èììóííûõ ñûâîðîòîê, çàòåì äîáàâëÿþò ïî 1 êàïëå èñïûòóåìîãî ìàòåðèàëà è 1 êàïëå 5% âçâåñè ýðèòðîöèòîâ. Ó÷åò ðåçóëüòàòîâ: òèï âèðóñà îïðåäåëÿþò ïî òîé ñûâîðîòêå, ñ êîòîðîé ðåàêöèÿ íå ïðîèçîøëà, òàê êàê èììóííàÿ ñûâîðîòêà, ñïåöèôè÷åñêàÿ äëÿ âûäåëåííîãî âèðóñà, ïîäàâëÿåò åãî ãåìàããëþòèíèðóþùóþ àêòèâíîñòü, è ýðèòðîöèòû íå àããëþòèíèðóþòñÿ. |
question
Ðåàêöèÿ íåéòðàëèçàöèè âèðóñîâ |
answer
Ðåàêöèÿ íåéòðàëèçàöèè îñíîâàíà íà ñïîñîáíîñòè ñïåöèôè÷åñêèõ èììóííûõ ñûâîðîòîê ãàñèòü èíôåêöèîííîå äåéñòâèå âèðóñîâ. Ïðèìåíÿåòñÿ â äâóõ íàïðàâëåíèÿõ: 1) äëÿ òèïèðîâàíèÿ âûäåëåííûõ âèðóñîâ; 2) äëÿ òèòðîâàíèÿ àíòèòåë â ñûâîðîòêàõ ïåðåáîëåâøèõ. Ïîñòàíîâêà ðåàêöèè: 1. Íà ëàáîðàòîðíûõ æèâîòíûõ. Êðèòåðèåì íàëè÷èÿ âèðóñà ñëóæèò ãèáåëü ëàáîðàòîðíûõ æèâîòíûõ. Âûñ÷èòûâàåòñÿ LD50 - ïðåäåëüíîå ðàçâåäåíèå âèðóñíîé ñóñïåíçèè, êîòîðîå âûçûâàëî ãèáåëü 50% çàðàæåííûõ æèâîòíûõ. Äëÿ èäåíòèôèêàöèè âèðóñà êëåùåâîãî ýíöåôàëèòà ïðîâîäÿò âíóòðèìîçãîâîå çàðàæåíèå áåëûõ ìûøåé. 2.  òêàíåâûõ êóëüòóðàõ. Ó÷åò ðåçóëüòàòîâ ïðîâîäÿò - ïî öèòîïàòè÷åñêîìó äåéñòâèþ (ÖÏÄ) - ïî ìåòîäó öâåòíîé ïðîáû, îñíîâàííîé íà èçìåíåíèè öâåòà èíäèêàòîðà ñðåäû â ðåçóëüòàòå äåãåíåðàöèè êëåòîê; - ïî ãåìàäñîðáöèè. 3.  Êóðèíîì ýìáðèîíå. Ó÷åò ðåçóëüòàòîâ ïðîâîäèòñÿ ïî ïîÿâëåíèþ îñïèí ïî õîðèîíàëëàíòîèñíîé îáîëî÷êå. |
question
Ðåàêöèÿ ôëîêóëÿöèè |
answer
Ïðîòåêàåò in vitro (â ïðîáèðêå) ïðè ýêâèâàëåíòíîì ñîîòíîøåíèè àíòèãåíà è àíòèòåëà. Ñîïðîâîæäàåòñÿ ïîìóòíåíèåì è âûïàäåíèåì îñàäêà. Ôåíîìåí ôëîêóëÿöèè èñïîëüçóþò: - äëÿ îïðåäåëåíèÿ ôëîêêóëèðóþùåé àêòèâíîñòè òîêñèíîâ; - äëÿ òèòðîâàíèÿ àíòèòîêñè÷åñêèõ ñûâîðîòîê. Íàïðèìåð, ïðè äèôòåðèè èñïîëüçóåòñÿ ðåàêöèÿ ôëîêóëÿöèè ñ äèôòåðèéíûì àíàòîêñèíîì.  ïðîáèðêå, ãäå êîëè÷åñòâî ñûâîðîòêè è àíàòîêñèíà ýêâèâàëåíòíî, âûïàäàþò íåæíûå õëîïüÿ. Êîëè÷åñòâî àíàòîêñèíà, äàþùåå â ñìåñè 1 ÀÅ ñûâîðîòêè èíèöèàëüíóþ ôëîêóëÿöèþ, íàçûâàåòñÿ 1 èììóíîãåííîé åäèíèöåé àíàòîêñèíà (1 ÈÅ). |
question
ÐÏÃÀ |
answer
Àíòèòîêñè÷åñêèé ïðîòèâîäèôòåðèéíûé èììóíèòåò ïðîâåðÿþò ñ ïîìîùüþ ÐÏÃÀ ñ äèôòåðèéíûì ýðèòðîöèòàðíûì äèàãíîñòèêóìîì (àíàòîêñèíîì). Íåèìóííûìè ñ÷èòàþòñÿ ëèöà ñ òèòðîì àíòèòîêñèíà ìåíåå 0,03 ÌÅ/ìã Èíãðåäèåíòû: 1. Èñïûòóåìàÿ ñûâîðîòêà, àäñîðáèðîâàííàÿ áàðàíüèìè ýðèòðîöèòàìè; 2. Ýðèòðîöòàðíûé äèàãíîñòèêóì; 3. Ôèçèîëîãè÷åñêèé ðàñòâîð; 4. Ïðîòèâîäèôòåðèéíàÿ êîíòðîëüíàÿ ñûâîðîòêà àêòèâíîñòüþ 10 ME. Ïîñòàíîâêà ðåàêöèè: 1) Ñûâîðîòêó ðàçâîäÿò ôèçèîëîãè÷åñêèì ðàñòâîðîì â 12 ëóíêàõ îò 1:10 äî 1:20480(1:40-1:5120) 2)  êàæäóþ ëóíêó äîáàâëÿþò ïî 1 êàïëå äèàãíîñòèêóìà; 3) Ïðîòèâîäèôòåðèéíóþ êîíòðîëüíóþ ñûâîðîòêó ðàçâîäÿò òàêæå îò 1:10 äî 1:20480 è âíîñÿò ïî 1 êàïëå äèàãíîñòèêóìà; 4) Îñòàâëÿþò íà 3 ÷àñà ïðè êîìíàòíîé òåìïåðàòóðå. |
question
ÐÈÔ |
answer
Ðåàêöèÿ îòíîñèòñÿ ê ñåðîëîãè÷åñêèì ðåàêöèÿì ñ ó÷àñòèåì ìå÷åíûõ àíòèãåíîâ èëè àíòèòåë. Ïðîâîäèòñÿ ïðÿìûì è íåïðÿìûì ìåòîäàìè. Ïðè ïðÿìîì ìåòîäå îáíàðóæèâàþò àíòèãåí â ìàòåðèàëå îò áîëüíîãî. Èñïîëüçóåòñÿ äèàãíîñòè÷åñêàÿ ôëþîðåñöèðóþùàÿ ñûâîðîòêà, êîòîðàÿ ñîäåðæèò èììóíîãëîáóëèíû, âûäåëåííûå èç èììóííûõ ñûâîðîòîê è ìå÷åííûå ôëþîðîõðîìàìè. Ñïåöèôè÷åñêèé àíòèãåí îáíàðóæèâàåòñÿ â âèäå ÿðêî-çåëåíûõ ëþìèíåñöèðóþùèõ êîíãëîìåðàòîâ, à ôîí ïðåïàðàòà îêðàøèâàåòñÿ â îðàíæåâî-êðàñíûé öâåò. Êîìïîíåíòû ðåàêöèè ïðÿìîé èììóíîôëþîðåñöåíöèè: Äëÿ ïîèñêà àíòèãåíà ïðè ýêñïðåññ-äèàãíîñòèêå: 1) èññëåäóåìûé ìàòåðèàë; 2) ñïåöèôè÷åñêàÿ ëþìèíåñöåíòíàÿ ñûâîðîòêà; 3) ëþìèíåñöåíòíûé ìèêðîñêîï. Ïðè äèàãíîñòèêå ãðèïïà ïðîâîäÿò äèôôåðåíöèàöèþ îò âîçáóäèòåëåé ïàðàãðèïïà è àäåíîâèðóñíîé èíôåêöèè. Íîñîãëîòî÷íûé ìàçîê îáðàáàòûâàþò ôëþîðåñöèðóþùåé ãðèïïîçíîé ñûâîðîòêîé èëè ãðèïïîçíûì èììóíîãëîáóëèíîì. «+» ðåçóëüòàò â âèäå çåëåíîãî ñâå÷åíèÿ ïîëó÷àþò ÷åðåç 3 ÷àñà. Ïðè íåïðÿìîì ìåòîäå ïðîâîäÿò îáíàðóæåíèå è òèòðîâàíèå ñïåöèôè÷åñêèõ àíòèòåë. Òèòðîì ñûâîðîòêè íàçûâàåòñÿ åå ìàêñèìàëüíîå ðàçâåäåíèå, ïðè êîòîðîì îòìå÷àåòñÿ ôëþîðåñöåíöèÿ íà «+ +». Êîìïîíåíòû ðåàêöèè íåïðÿìîé èììóíîôëþîðåñöåíöèè Äëÿ ïîèñêà àíòèãåíà ïðè ýêñïðåññ-äèàãíîñòèêå: 1) èññëåäóåìûé ìàòåðèàë (àíòèãåí); 2) ñïåöèôè÷åñêàÿ ñûâîðîòêà; 3) àíòèãëîáóëèíîâàÿ ëþìèíåñöåíòíàÿ ñûâîðîòêà 4) ëþìèíåñöåíòíûé ìèêðîñêîï. / ôàçà ñïåöèôè÷åñêàÿ Ñûâîðîòî÷íûå àíòèòåëà àäñîðáèðóþòñÿ íà àíòèãåíå. // ôàçà íåñïåöèôè÷åñêàÿ Èñïîëüçóåòñÿ àíòèãëîáóëèíîâàÿ ñûâîðîòêà ñ àíòèòåëàìè, ìå÷åííûìè ôëþîðîõðîìàìè. Îáðàçóåòñÿ êîìïëåêñ àíòèãåí+àíòèòåëî (I) + àíòèãëîáóëèíîâàÿ ñûâîðîòêà (II), êîòîðûé ñâåòèòñÿ. |
question
ÏÖÐ |
answer
Ïîëèìåðàçíàÿ öåïíàÿ ðåàêöèÿ èìèòèðóåò åñòåñòâåííóþ ðåïëèêàöèþ ÄÍÊ è ïîçâîëÿåò îáíàðóæèòü åäèíñòâåííóþ ìîëåêóëó ÄÍÊ â ïðèñóòñòâèè äðóãèõ ìîëåêóë. Ñóòü ìåòîäà çàêëþ÷àåòñÿ â ðàçìíîæåíèè â ïðîáèðêå îïðåäåëåííûõ ó÷àñòêîâ ÄÍÊ â ïðîöåññå ïîâòîðÿþùèõñÿ òåìïåðàòóðíûõ öèêëîâ. Íà êàæäîì öèêëå âíîâü ñèíòåçèðîâàííûå ìîëåêóëû êîïèðóþòñÿ ÄÍÊ-ïîëèìåðàçîé. Áëàãîäàðÿ ýòîìó ïðîèñõîäèò ìíîãîêðàòíîå óäâîåíèå ñïåöèôè÷åñêèõ ôðàãìåíòîâ ÄÍÊ. Òåðìîñòàáèëüíàÿ ÄÍÊ-ïîëèìåðàçà, ïîëó÷åííàÿ èç òåðìîôèëüíûõ áàêòåðèé, ñëóæèò êàòàëèçàòîðîì ÏÖÐ.  ÏÖÐ ó÷àñòâóþò ïðàéìåðû - äâå èñêóññòâåííî ñèíòåçèðîâàííûå ìîëåêóëû ÄÍÊ, êîòîðûå êîìïëåìåíòàðíû ïîñëåäîâàòåëüíîñòÿì ÄÍÊ íà ëåâîé è ïðàâîé ãðàíèöàõ ñïåöèôè÷åñêîãî ôðàãìåíòà. Ñèíòåç ïðîòåêàåò òîëüêî ìåæäó ïðàéìåðàìè, è êîëè÷åñòâî êîïèé ôðàãìåíòà óäâàèâàåòñÿ. Ýòàïû öèêëà àìïëèôèêàöèè: 1. Äåíàòóðàöèÿ ÄÍÊ ïðè t=95°C 1 ìèí. 2. Îòæèã (ïðèñîåäèíåíèå) ïðàéìåðîâ, t=50-65°C 1-2 ìèí. 3. Ñèíòåç ôðàãìåíòà ÄÍÊ, t=72°C 1-3 ìèí. Ïðîäóêòû ñèíòåçà ïåðâîãî öèêëà àìïëèôèêàöèè ñëóæàò ìàòðèöåé äëÿ âòîðîãî öèêëà, à ïðîäóêòû ñèíòåçà âòîðîãî öèêëà - ìàòðèöåé äëÿ òðåòüåãî öèêëà àìïëèôèêàöèè. Öèêë àìïëèôèêàöèè ïðîâîäèòñÿ â òåðìî-öèêëåðå èëè àìïëèôèêàòîðå. Çà 30 öèêëîâ àìïëèôèêàöèè îáðàçóåòñÿ 10 êîïèé ñïåöèôè÷åñêîãî ôðàãìåíòà. 21 Äîñòîèíñòâà ÏÖÐ: 1) âûñîêàÿ ÷óâñòâèòåëüíîñòü è ñïåöèôè÷íîñòü; 2) áûñòðîòà; 3) âîçìîæíîñòü äèàãíîñòèêè âíóòðèêëåòî÷íûõ ïàðàçèòîâ è ïåðñèñòèðóþùèõ ìèêðîîðãàíèçìîâ; 4) èñïîëüçîâàíèå êëèíè÷åñêîãî ìàòåðèàëà, âçÿòîãî îò áîëüíîãî. |
question
ÈÔÀ |
answer
Ïðè ÈÔÀ â êà÷åñòâå ìåòêè ïðèìåíÿþò ôåðìåíòû. Èñïîëüçóåòñÿ â äèàãíîñòèêå ÑÏÈÄà è âèðóñíûõ ãåïàòèòîâ. Èììóíîôåðìåíòíàÿ ñèñòåìà «Ãåïà Ñòðèï» ïðåäíàçíà÷åíà äëÿ âûÿâëåíèÿ ïîâåðõíîñòíîãî HbsAg àíòèãåíà âèðóñà ãåïàòèòà Â. Êîìïîíåíòû: 1. Ïîëèñòèðîëîâûé ïëàíøåò; 2. Àíòèòåëà ê HbsAg; 3. Êîíúþãàò - ìûøèíûå ìîíîêëîíèàëüíûå àíòèòåëà, ìå÷åíûå ïåðîêñèäàçîé; 4. Êîíòðîëüíûå ñûâîðîòêè; 5. Ôîñôàòíî-ñîëåâîé áóôåð; 6. Îðòîôåíèëäèàìèí (ÎÔÄ). Ðåàêöèÿ ïðîòåêàåò â äâå ôàçû. HbsAg ñâÿçûâàåòñÿ ñ ãîìîëîãè÷íûìè àíòèòåëàìè, ìå÷åííûìè ïåðîêñèäàçîé. Çàòåì ñòàâÿò öâåòíóþ ðåàêöèþ ñ èñïîëüçîâàíèåì ÎÔÄ, ïðîèñõîäèò æåëòîå îêðàøèâàíèå. Ó÷åò ÈÔÀ - ïî îïòè÷åñêîé ïëîòíîñòè ñ ïîìîùüþ ôîòîìåòðà, ïðè ýòîì ñòåïåíü îïòè÷åñêîé ïëîòíîñòè áóäåò îáðàòíî ïðîïîðöèîíàëüíà êîíöåíòðàöèè HbsAg àíòèãåíà âèðóñà ãåïàòèòà Â. |
question
Ðåàêöèÿ ôàãîëèçèñà |
answer
Ðåàêöèÿ ôàãîëèçèñà ñòàâèòñÿ äëÿ èäåíòèôèêàöèè âîçáóäèòåëÿ äèçåíòåðèè. Ïîñòàíîâêà ðåàêöèè: 1) ÷èñòàÿ êóëüòóðà øèãåëë íà ñêîøåííîì àãàðå; 2) 2 ïðîáèðêè ñ ÌÏÁ - «îïûò» è «êîíòðîëü»; 3) äèçåíòåðèéíûé áàêòåðèîôàã Íà I ýòàïå: 1) Ïðîâåðêà êóëüòóðû øèãåëë íà ÷èñòîòó (îêðàñêà ïî Ãðàìó); 2) Ïîñåâ â 2 ïðîáèðêè ñ ÌÏÁ 3)  ïðîáèðêó «îïûò» äîáàâèòü 2 êàïëè (0,1 ìë) äèçåíòåðèéíîãî áàêòåðèîôàãà; 4) Ïîñåâû èíêóáèðîâàòü â òåðìîñòàòå 18-20 ÷àñîâ ïðè òåìïðàòóðå 37°Ñ Íà II ýòàïå: 1) Ðåãèñòðàöèÿ ðåçóëüòàòîâ ïîñåâà  ïðîáèðêå «êîíòðîëü» èìååòñÿ ðàâíîìåðíîå ïîìóòíåíèå ÌÏÁ, ò.ê. êóëüòóðà øèãåëë îêàçàëàñü æèçíåñïîñîáíîé.  ïðîáèðêå «îïûò» ÌÏÁ 20 ïðîçðà÷íûé, ò.å. äèçåíòåðèéíûé áàêòåðèîôàã âûçâàë ëèçèñ îäíîèìåííîé êóëüòóðû áàêòåðèé. |
question
Îïðåäåëåíèå ôàãîòèïà |
answer
Îïðåäåëåíèå ôàãîòèïà ïðîâîäèòñÿ ñ ïîìîùüþ ñïåöèàëüíûõ íàáîðîâ òèïîâûõ ôàãîâ è ÿâëÿåòñÿ îäíèì èç ìåòîäîâ âíóòðèâèäîâîé äèôôåðåíöèàöèè áàêòåðèé. Öåëè ôàãîòèïèðèâàíèÿ: 1. Ïîìîùü ýïèäåìèîëîãó â âûÿâëåíèè èñòî÷íèêîâ è ïóòåé öèðêóëÿöèè èíôåêöèè ïðè âíóòðèáîëüíè÷íîì çàðàæåíèè; 2. Äëÿ èäåíòèôèêàöèè ìèêðîáà. Îïðåäåëåíèå ôàãîòèïà ñòàôèëîêîêêà ïðîâîäÿò ïðè ïîìîùè ôàãîâ, ðàçâåäåííûõ äî òåñò- ðàçâåäåíèÿ, îáîçíà÷åííîãî íà ýòèêåòêå. Êàïëþ 4-õ ÷àñîâîé áóëüîííîé êóëüòóðû ðàñïðåäåëÿþò íà ïîâåðõíîñòè ïîäñóøåííîãî àãàðà â ÷àøêå Ïåòðè. Äíî ÷àøêè ðàñ÷åð÷èâàþò íà 22 êâàäðàòà ïî ÷èñëó ôàãîâ, çàòåì êàïàþò ôàãè ïî îäíîìó â êàæäûé êâàäðàò. Ïîñåâ èíêóáèðóþò â òåðìîñòàòå 18 ÷àñîâ* ïðè òåìïåðàòóðå 37°Ñ. Íà 2-é äåíü ïðîâîäÿò ó÷¸ò ðåçóëüòàòîâ; ôàãîòèï êóëüòóðû ñîîòâåòñòâóåò òîìó ôàãó, êîòîðûé â òåñò-ðàçâåäåíèè âûçûâàåò å¸ ïîëíûé ëèçèñ.  çàâèñèìîñòè îò ÷óâñòâèòåëüíîñòè êóëüòóðû ê ôàãó íàáëþäàåòñÿ ðàçíàÿ ñòåïåíü ëèçèñà: + + + + - ñïëîøíîé ëèçèñ + + + - ñëèâíîé ëèçèñ ñ âòîðè÷íûì ðîñòîì + + - áîëåå 50 íåãàòèâíûõ êîëîíèé (ñòåðèëüíûõ ïÿòåí) + - åäèíè÷íûå íåãàòèâíûå êîëîíèè (ñòåðèëüíûå ïÿòíà) - ëèçèñà íåò Òàêæå ïðîâîäèòñÿ ôàãîòèïèðîâàíèå áðþøíîòèôîçíûõ (44 òèïà) è ïàðàòèôîçíûõ áàêòåðèé (15 òèïîâ), ýíòåðîïàòîãåííûõ ýøåðèõèé (24 òèïà). |
question
Ìåòîä áóìàæíûõ äèñêîâ |
answer
«áóìàæíûõ äèñêîâ» Áèîëîãè÷åñêàÿ àêòèâíîñòü àíòèáèîòèêîâ âûðàæàåòñÿ â ìåæäóíàðîäíûõ åäèíèöàõ (ME). Çà åäèíèöó àêòèâíîñòè ïðèíèìàåòñÿ òî ìèíèìàëüíîå êîëè÷åñòâî àíòèáèîòèêà, êîòîðîå çàäåðæèâàåò ðîñò ñòàíäàðòíîãî øòàììà, îïðåäåëåííîãî âèäà ìèêðîîðãàíèçìà â ñòðîãî îïðåäåëåííûõ óñëîâèÿõ. Ñòåïåíü ÷óâñòâèòåëüíîñòè ê àíòèáèîòèêàì íåîáõîäèìîì îïðåäåëÿòü äëÿ óñïåøíîãî ïðîâåäåíèÿ ëå÷åíèÿ. Íàèáîëåå ðàñïðîñòðàíåí ìåòîä «áóìàæíûõ äèñêîâ»: â ÷àøêó Ïåòðè ñ ÌÏÀ «ãàçîíîì» çàñåâàþò âçâåñü èçó÷àåìîé êóëüòóðû ìèêðîáà. Íà çàñåÿííóþ ïîâåðõíîñòü àãàðà ïèíöåòîì íàêëàäûâàþò áóìàæíûå äèñêè, ïðîïèòàííûå àíòèáèîòèêàìè. Äèñêè ðàñïîëàãàþò íà ðàâíîì ðàññòîÿíèè äðóã îò äðóãà è íà ðàññòîÿíèè îò êðàÿ ÷àøêè 15 ìì. ×àøêè âûäåðæèâàþò â òåðìîñòàòå 18-20 ÷àñîâ ïðè òåìïåðàòóðå 37 °Ñ. Ó÷¸ò ðåçóëüòàòîâ ïðîâîäÿò íà 2-îé äåíü ïóòåì èçìåðåíèÿ çîí çàäåðæêè ðîñòà. Äèàìåòð çîíû çàäåðæêè ðîñòà: Ìåíüøå 10 ìì - øòàìì óñòîé÷èâûé 11-15 ìì - øòàìì ìàëîóñòîé÷èâûé 15-25 ìì - øòàìì ÷óâñòâèòåëüíûé 19 áîëüøå 25ìì - øòàìì âûñîêî÷óâñòâèòåëüíûé. |
question
Ðåàêöèÿ ÃÀ |
answer
Ðåàêöèÿ ãåìàããëþòèíàöèè- ýòî îäèí èç ìåòîäîâ èíäèêàöèè âèðóñîâ. Ñòàâèòñÿ äâóìÿ ìåòîäàìè: 1) êàïåëüíûì íà ñòåêëå; 2) â ïðîáèðêàõ - ðàçâåðíóòàÿ ðåàêöèÿ. Êîìïîíåíòû: 1) èññëåäóåìûé ìàòåðèàë: àëëàíòîèñíàÿ æèäêîñòü, ñóñïåíçèÿ õîðèîíàëëàíòîèñíîé îáîëî÷êè êóðèíîãî ýìáðèîíà, ýêñòðàêò èç êóëüòóðû êëåòîê, çàðàæåííûõ âèðóñîì; 2) 5% âçâåñü êóðèíûõ ýðèòðîöèòîâ; 3) ôèçèîëîãè÷åñêèé ðàñòâîð. Íà ÷èñòîå îáåçæèðåííîå ñòåêëî íàíîñÿò 1 êàïëþ âçâåñè ýðèòðîöèòîâ è 1 êàïëþ èññëåäóåìîãî ìàòåðèàëà. Ïðè «+» ðåçóëüòàòå - õëîïüÿ àããëþòèíàöèè ýðèòðîöèòîâ. |
question
Îïðåäåëåíèå òèòðà è ðàáî÷åé äîçû êîìïëåìåíòà |
answer
Êîìïëåìåíò - íåñïåöèôè÷åñêèé òåðìîëàáèëüíûé ôàêòîð èñïîëüçóåòñÿ â ðÿäå ñåðîëîãè÷åñêèõ ðåàêöèé. Òèòð 'êîìïëåìåíòà - ýòî ìèíèìàëüíîå êîëè÷åñòâî, êîòîðîå ñïîñîáíî ãåìîëèçèðîâàòü ýðèòðîöèòû â ãåìîëèòè÷åñêîé ñèñòåìå. Ðàáî÷àÿ äîçà êîìïëåìåíòà ïðåâûøàåò òèòð íà 20-25%, òàê êàê ëþáîé àíòèãåí ìîæåò îáëàäàòü àíòèêîìïëåìåíòàðíûìè ñâîéñòâàìè, ê òèòðó äåëàþò íàäáàâêó. Íàïðèìåð, åñëè òèòð 0,4ìë, òî ðàáî÷àÿ äîçà äîëæíà áûòü 0,5ìë. 18 Êîìïîíåíòû ðåàêöèè: 1) àíòèãåí - 3% âçâåñü ýðèòðîöèòîâ áàðàíà; 2) ãåìîëèòè÷åñêàÿ ñûâîðîòêà, ïîëó÷åííàÿ ïðè ãèïåðèììóíèçàöèè êðîëèêà ýðèòðîöèòàìè áàðàíà; 3) êîìïëåìåíò - ñâåæàÿ èëè ëèîôèëüíî âûñóøåííàÿ ñûâîðîòêà êðîâè ìîðñêîé ñâèíêè. Ñìåñü ðàâíûõ îáúåìîâ âçâåñè ýðèòðîöèòîâ áàðàíà è ãåìîëèòè÷åñêîé ñûâîðîòêè ïðåäñòàâëÿåò ñîáîé ãåìîëèòè÷åñêóþ ñèñòåìó, èñïîëüçóåìóþ âî âòîðîé ôàçå ÐÑÊ. «+» ðåàêöèÿ õàðàêòåðèçóåòñÿ íàëè÷èåì ãåìîëèçà; «-» ðåàêöèÿ õàðàêòåðèçóåòñÿ îòñóòñòâèåì ãåìîëèçà. |
question
Ïîñòàíîâêà è ó÷åò ÐÑÊ (ïî Áîðäå-Æàíãó) |
answer
Ðåàêöèÿ ñâÿçûâàíèÿ êîìïëåìåíòà - ýòî ñëîæíàÿ äâóõñèñòåìíàÿ ñåðîëîãè÷åñêàÿ ðåàêöèÿ. Òåñò-ñèñòåìà ñîñòîèò èç êîìïëåêñà àíòèãåí-àíòèòåëî. Âèçóàëüíî ðåçóëüòàò ðåàêöèè íåâèäèì. Èíäèêàòîðíàÿ ñèñòåìà ñîñòîèò èç ýðèòðîöèòîâ áàðàíà è ãåìîëèòè÷åñêîé ñûâîðîòêè. Îáðàçóþùèåñÿ êîìïëåêñû îáåèõ ñèñòåì ñïîñîáíû ñâÿçûâàòü êîìïëåìåíò. Ïðè ïîëîæèòåëüíîì ðåçóëüòàòå àíòèãåí è àíòèòåëî òåñò-ñèñòåìû êîìïëåìåíòàðíû, íà îáðàçîâàâøåìñÿ êîìïëåêñå àäñîðáèðóþòñÿ êîìïëèìåíò â ðàáî÷åé äîçå, ãåìîëèç íå ïðîèñõîäèò. Ïðè îòðèöàòåëüíîì ðåçóëüòàòå â èñïûòóåìîé ñûâîðîòêå àíòèòåëà îòñóòñòâóþò è êîìïëåêñ àíòèãåí-àíòèòåëî íå ôîðìèðóåòñÿ, îñòàâøèéñÿ ñâîáîäíûì êîìïëåìåíò àäñîðáèðóåòñÿ íà ãåìîëèòè÷åñêîé ñèñòåìå è ïðîèñõîäèò ãåìîëèç. ÐÑÊ Áîðäå-Æàíãó ñòàâèòñÿ ïðè õðîíè÷åñêîé ãîíîðåå (ó æåíùèí). Êîìïîíåíòû ÐÑÊ Áîðäå-Æàíãó: 1) èñïûòóåìàÿ ñûâîðîòêà â ðàçâåäåíèè 1:5; 2) ãîíîêîêêîâûé àíòèãåí; 3) êîìïëåìåíò â ðàáî÷åé äîçå; 4) 3% âçâåñü ýðèòðîöèòîâ áàðàíà; 5) ãåìîëèòè÷åñêàÿ ñûâîðîòêà. Ðåàêöèÿ ñòàâèòñÿ â 2-õ ïðîáèðêàõ. «+» ðåçóëüòàò - îòñóòñòâèå ãåìîëèçà ýðèòðîöèòîâ; «-» ðåçóëüòàò - íàëè÷èå ãåìîëèçà ýðèòðîöèòîâ. |
question
Ïîñòàíîâêà è ó÷åò ÐÑÊ (ïî Áîðäå-Æàíãó) |
answer
Ðåàêöèÿ ñâÿçûâàíèÿ êîìïëåìåíòà - ýòî ñëîæíàÿ äâóõñèñòåìíàÿ ñåðîëîãè÷åñêàÿ ðåàêöèÿ. Òåñò-ñèñòåìà ñîñòîèò èç êîìïëåêñà àíòèãåí-àíòèòåëî. Âèçóàëüíî ðåçóëüòàò ðåàêöèè íåâèäèì. Èíäèêàòîðíàÿ ñèñòåìà ñîñòîèò èç ýðèòðîöèòîâ áàðàíà è ãåìîëèòè÷åñêîé ñûâîðîòêè. Îáðàçóþùèåñÿ êîìïëåêñû îáåèõ ñèñòåì ñïîñîáíû ñâÿçûâàòü êîìïëåìåíò. Ïðè ïîëîæèòåëüíîì ðåçóëüòàòå àíòèãåí è àíòèòåëî òåñò-ñèñòåìû êîìïëåìåíòàðíû, íà îáðàçîâàâøåìñÿ êîìïëåêñå àäñîðáèðóþòñÿ êîìïëèìåíò â ðàáî÷åé äîçå, ãåìîëèç íå ïðîèñõîäèò. Ïðè îòðèöàòåëüíîì ðåçóëüòàòå â èñïûòóåìîé ñûâîðîòêå àíòèòåëà îòñóòñòâóþò è êîìïëåêñ àíòèãåí-àíòèòåëî íå ôîðìèðóåòñÿ, îñòàâøèéñÿ ñâîáîäíûì êîìïëåìåíò àäñîðáèðóåòñÿ íà ãåìîëèòè÷åñêîé ñèñòåìå è ïðîèñõîäèò ãåìîëèç. ÐÑÊ Áîðäå-Æàíãó ñòàâèòñÿ ïðè õðîíè÷åñêîé ãîíîðåå (ó æåíùèí). Êîìïîíåíòû ÐÑÊ Áîðäå-Æàíãó: 1) èñïûòóåìàÿ ñûâîðîòêà â ðàçâåäåíèè 1:5; 2) ãîíîêîêêîâûé àíòèãåí; 3) êîìïëåìåíò â ðàáî÷åé äîçå; 4) 3% âçâåñü ýðèòðîöèòîâ áàðàíà; 5) ãåìîëèòè÷åñêàÿ ñûâîðîòêà. Ðåàêöèÿ ñòàâèòñÿ â 2-õ ïðîáèðêàõ. «+» ðåçóëüòàò - îòñóòñòâèå ãåìîëèçà ýðèòðîöèòîâ; «-» ðåçóëüòàò - íàëè÷èå ãåìîëèçà ýðèòðîöèòîâ. |
question
Ðåàêöèÿ íåéòðàëèçàöèè òîêñèíà àíòèòîêñèíîì |
answer
Ðåàêöèÿ íåéòðàëèçàöèè òîêñèíà àíòèòîêñèíîì ïî Îóõòåðëîíè ïðîâîäèòñÿ äëÿ îïðåäåëåíèÿ òîêñèãåííîñòè äèôòåðèéíîé ïàëî÷êè, ÷òî îñîáåííî âàæíî äëÿ ýïèäåìèîëîãèè è äèàãíîñòèêè äàííîé èíôåêöèè.  ÷àøêó Ïåòðè ñ ÌÏÀ íàêëàäûâàþò ïîëîñêó ôèëüòðîâàëüíîé áóìàãè, ïðîïèòàííîé àíòèòîêñè÷åñêîé äèôòåðèéíîé ñûâîðîòêîé. Ïî îáåèì ñòîðîíàì áóìàãè çàñåâàþò èçó÷àåìûå êóëüòóðû â âèäå øòðèõîâ è áëÿøåê.  êàæäîé ÷àøêå äåëàþò êîíòðîëüíûé ïîñåâ øòàììà PV-8. ×åðåç 24-48 ÷àñîâ èíêóáàöèè â òåðìîñòàòå ïðè íàëè÷èè ó êóëüòóðû òîêñèíà, ïîñëåäíèé äèôôóíäèðóåò â àãàð. Íà ìåñòå âñòðå÷è òîêñèíà ñ àíòèòîêñèíîì îáðàçóþòñÿ áåëûå ëèíèè ïðåöèïèòàòà. |
question
Ðåàêöèÿ Ï |
answer
Ðåàêöèÿ ïðåöèïèòàöèè îòíîñèòñÿ ê ñåðîëîãè÷åñêèì ðåàêöèÿì ïðè áàêòåðèàëüíûõ èíôåêöèÿõ è îòëè÷àåòñÿ âûñîêîé ÷óâñòâèòåëüíîñòüþ è ñïåöèôè÷íîñòüþ. Ôåíîìåí ïðåöèïèòàöèè çàêëþ÷àåòñÿ â òîì, ÷òî ïðåöèïèòèíû, ñîåäèíÿÿñü ñ ïðåöèïèòèíîãåíàìè, âûçûâàþò âûïàäåíèå îñàäêà-ïðåöèïèòàòà. Ðåàêöèÿ Àñêîëè ñòàâèòñÿ ñ öåëüþ îáíàðóæåíèÿ â îðãàíàõ òðóïà ñèáèðåÿçâåííîãî àíòèãåíà. Êîìïîíåíòû ðåàêöèè: 1) àíòèãåí - òåðìîýêñòðàêò èç èçìåëü÷åííûõ êóñî÷êîâ îðãàíîâ; 2) äèàãíîñòè÷åñêàÿ ñûâîðîòêà; 3) ôèçèîëîãè÷åñêèé ðàñòâîð. Ðåàêöèÿ ñòàâèòñÿ â óçêèõ ïðåöèïèòàöèîííûõ ïðîáèðêàõ: íàëèâàþò ïî 0,1 ìë íåðàçâåäåííîé ñûâîðîòêè, çàòåì ïî ñòåíêå ïðîáèðêè íàñëàèâàþò íà ñûâîðîòêó àíòèãåí. Ïðè «+» ðåçóëüòàòå íà ãðàíèöå îáåèõ æèäêîñòåé îáðàçóåòñÿ ïëîòíîå áåëîå êîëüöî. |
question
ðåàêöèÿ Âåéãëÿ |
answer
Ñòàâèòñÿ ñ 8 äíÿ áîëåçíè ïðè ñûïíîì òèôå è áîëåçíè Áðèëëÿ-Öèíññåðà äëÿ îáíàðóæåíèÿ àíòèòåë â èñïûòóåìîé ñûâîðîòêå êðîâè. Êîìïîíåíòû ðåàêöèè Âåéãëÿ: 1) èñïûòóåìàÿ ñûâîðîòêà â ðàçâåäåíèÿõ 1:50, 1:100, 1:200, 1:400, 1:800; 2) ðèêêåòñèîçíûé äèàãíîñòèêóì - âçâåñü óáèòûõ ðèêêåòñèé Ïðîâà÷åêà 3) ôèçèîëîãè÷åñêèé ðàñòâîð Ðåàêöèÿ ïðèìåíÿåòñÿ ïðè ðåöèäèâàõ ýïèäåìè÷åñêîãî ñûïíîãî òèôà (áîëåçíè Áðèëëÿ-Öèíññåðà), îáóñëîâëåííûõ ðåàêòèâàöèåé ðèêêåòñèé Ïðîâà÷åêà â ñûïíîòèôîçíûõ ãðàíóëåìàõ. |
question
Ðåàêöèÿ Âèäàëÿ |
answer
Ðåàêöèÿ àããëþòèíàöèè øèðîêî ïðèìåíÿåòñÿ â ëàáîðàòîðíîé ïðàêòèêå äëÿ ñåðîäèàãíîñòèêè. Ðåàêöèÿ àããëþòèíàöèè ïðîòåêàåò â äâå ôàçû: 1 ôàçà - ñîåäèíåíèå àíòèãåíà ñ àíòèòåëîì; 2 ôàçà - àäñîðáöèÿ íà êîìïëåêñå àíòèãåí+àíòèòåëî ôèçèîëîãè÷åñêîãî ðàñòâîðà è âûïàäåíèå îñàäêà äâóõ âèäîâ: à) êðóïíîõëîï÷àòîãî - ó æãóòèêîâûõ áàêòåðèé (Í-àããëþòèíàöèÿ); á) ìåëêîçåðíèñòîãî - àããëþòèíàò îáðàçóåòñÿ â âèäå êîìïàêòíûõ çåðåí (Î-àããëþòèíàöèÿ). Êîìïîíåíòû ðåàêöèè Âèäàëÿ: 16 1) èñïûòóåìàÿ ñûâîðîòêà â ðàçâåäåíèÿõ 1:100, 1:200, 1:400, 1:800, 1:1600; 2) äèàãíîñòèêóìû - âçâåñü óáèòûõ ñàëüìîíåëë òðåõ âèäîâ: áðþøíîãî òèôà, ïàðàòèôà À è Â; 3) ôèçèîëîãè÷åñêèé ðàñòâîð. Öåëü ðåàêöèè: îïðåäåëåíèå òèòðà àíòèòåë â èñïûòóåìîé ñûâîðîòêå. Ðåàêöèÿ àããëþòèíàöèè äîëæíà ñîïðîâîæäàòüñÿ êîíòðîëåì àíòèãåíà è ñûâîðîòêè. Ðåàêöèÿ ñòàâèòñÿ â òðåõ ðÿäàõ. Ó÷åò ðåçóëüòàòîâ ïðîâîäÿò ÷åðåç 18-20 ÷àñîâ. Ñòåïåíü ïîëîæèòåëüíîé ðåàêöèè àããëþòèíàöèè îáîçíà÷àåòñÿ ïëþñàìè: + + + + ïîëíàÿ àããëþòèíàöèÿ + + + íåïîëíàÿ àããëþòèíàöèÿ + + ñëàáàÿ àããëþòèíàöèÿ - îñàäêà íåò (îòðèöàòåëüíàÿ ðåàêöèÿ) |
question
Ïîñòàíîâêà ðåàêöèé ÀÃ íà ñòåêëå |
answer
Ðåàêöèÿ øèðîêî ïðèìåíÿåòñÿ äëÿ ñåðîëîãè÷åñêîé èäåíòèôèêàöèè âûäåëåííûõ ìèêðîáîâ, à òàêæå ïðè ïîñòàíîâêå óñêîðåííûõ ñåðîëîãè÷åñêèõ ðåàêöèé. Ïîñòàíîâêà ðåàêöèè: Ïàñòåðîâñêîé ïèïåòêîé íàíîñÿò íà ïðåäìåòíîå ñòåêëî êàïëþ ñûâîðîòêè â íóæíûõ ðàçâåäåíèÿõ.  êàæäóþ êàïëþ ñûâîðîòêè âíîñÿò ïåòëþ 24-÷àñîâîé àãàðîâîé æèâîé êóëüòóðû èëè êàïëþ äèàãíîñòèêóìà. Ïîñòàíîâêà ðåàêöèè äîëæíà ñîïðîâîæäàòüñÿ êîíòðîëåì àíòèãåíà è êîíòðîëåì ñûâîðîòêè. Ó÷åò ðåàêöèè ïðîèçâîäÿò ÷åðåç 5-10 ìèíóò. Êîìïîíåíòû: 1. Àíòèãåíû íåèçâåñòíîãî âèäà; 2. Èçâåñòíàÿ èììóííàÿ ñûâîðîòêà; 3. Ôèçèîëîãè÷åñêèé ðàñòâîð. |